RNAポリメラーゼIIの非リン酸化形態とTATA結合タンパク質の間の特定の相互作用

A Usheva¹, E Maldonado, A Goldring

¹Department of Molecular Genetics and Virology, Weizmann Institute of Science, Rehovot, Israel.

Cell

|May 29, 1992

まとめ

RNAポリメラーゼIIのカルボキシ末端領域 (CTD) は,転写に不可欠である. TATA結合タンパク質 (TBP) との相互作用は,遺伝子転写の開始に不可欠であり,リン酸化が結合に影響する.

科学分野:

分子生物学は分子生物学である.
バイオケミストリーバイオケミストリー
遺伝子規制遺伝子規制

背景:

RNAポリメラーゼIIは,タンパク質をコードする遺伝子を転写する中心的な酵素です.
RNAポリメラーゼIIのカルボキシ末端ドメイン (CTD) は,転写における規制的な役割を果たします.
TATA結合タンパク質 (TBP) は,クラスIIプロモーターにおける転写の開始に必要な重要な転写因子である.

研究の目的:

転写活動におけるRNAポリメラーゼIICTDヘプタマーリピートの役割を調査する.
RNAポリメラーゼIIとTATA結合タンパク質 (TBP) の相互作用を決定する.
CTDがTBPとの相互作用を媒介するメカニズムを解明する.

主な方法:

アフィニティクロマトグラフィは,RNAポリメラーゼII CTD.CTDの固定ヘプタマー繰り返しの列を用いて行われます.
転写的に活性な成分を分離するために,HeLa細胞抽出物の分化.
転写活動とタンパク質対タンパク質相互作用を測定するためのアッセイ.

主要な成果:

HeLa細胞抽出物は,ワイルド型CTDヘプタマーリピートを含む列に分割されたとき,転写活動を失いました.
この活動喪失は,突然変異したバージョンには何の効果もなかったので,野生型の繰り返しに特異的でした.
トランスクリプション活動は,TFIID,TBP,またはコラムから溶解されたタンパク質を加えることで回復され,TBPの関与を示しました.
RNAポリメラーゼIIは,非リン酸化形態のTBPに特異的に結合し,リン酸化形態は相互作用しなかった.
RNAポリメラーゼIIのCTDは,TBPとの特定の相互作用の媒介因子として特定されました.

結論:

CTDヘプタマー反復は,RNAポリメラーゼIIの転写能力を維持するために不可欠です.
RNAポリメラーゼIIとTBPの相互作用は,転写開始に不可欠であり,CTDによって媒介されます.
RNAポリメラーゼIIのリン酸化状態は,TBPと相互作用する能力に影響し,転写における規制的役割を示唆する.

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