タンパク質抽出手順に対するペプチジルトランスファーゼの異常な耐性

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• バイオケミストリー バイオケミストリー
• 微生物学 微生物学とは

背景:

• ペプチジルトランスファーゼは,リボソーム内のペプチド結合形成を触媒化する.
• 核酸複合体からタンパク質を取り除くための従来の方法は,しばしばこの酵素を無効化する.

研究 の 目的:

• 様々な生化学的治療に対するペプチジルトランスファーゼの活性に対する耐性を調査する.
• ペプチジルトランスファーゼの機能におけるリボソームRNAの潜在的な役割を調査する.

主な方法:

• ペプチジルトランスファーゼ活性を測定するために"断片反応"アッセイを使用しました.
• プロテインゼK,SDS,フェノール抽出,およびEDTAを含む,バクテリアのリボソームおよびサブユニットへの適用された処理.
• 特定の抗生物質 (クロラムフェニコル,カルボマイシン) とリボヌクレアースT1.1による試験された阻害.

主要な成果:

• エシェリキア大腸菌のリボソームは,プロテインゼK/SDS治療後に20-40%の活性を維持したが,フェノール抽出またはEDTA暴露後にそれを失った.
• Thermus aquaticusのリボソームは,広範なプロテインゼK/SDSおよびフェノール処理の後でも80%以上の活性を維持しました.
• 活性はペプチジルトランスファーゼ抗生物質によって特異的に抑制され,リボヌクレアゼT1.1によって廃止されました.

結論:

• ペプチジルトランスファーゼは,タンパク質除去手順に対して有意な抵抗性を示しています.
• RNase T1に対する安定性と感受性は,23SリボソームRNAがペプチジルトランスファーゼの触媒化に直接的な役割を果たしていることを示唆しています.