E2Fのような性質を持つレチノブラストーマ結合タンパク質をコードするcDNAの表現クローニング
W G Kaelin1, W Krek, W R Sellers
1Dana Farber Cancer Institute, Boston, Massachusetts.
Cell
|August 3, 1992
まとめ
研究者は,網膜芽細胞腫 (RB) のタンパク質ポケットに結合するタンパク質であるRBAP-1を特定しました. RBAP-1はE2Fの一種で,細胞成長制御に不可欠な転写因子である.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- がん研究 がん研究
- ウイルス学 ウイルス学 ウイルス学
背景:
- 網膜芽細胞腫 (RB) タンパク質は,細胞成長の重要な調節因子である.
- RBタンパク質の"ポケット"ドメインは,E2Fのような細胞転写因子と相互作用する.
- E2Fは細胞増殖の制御に関与しています.
研究 の 目的:
- RBタンパク質と相互作用する新しいタンパク質を特定する.
- 新しく特定されたRB結合タンパク質の機能と結合特性を特徴付けるため.
主な方法:
- 急速なタンパク質合成のためのグルタチオンS-トランスファーゼ (GST) -レチノブラストーマ (RB) 融合タンパク質発現システムの構築と使用.
- RB結合タンパク質を特定するために,lambda gt11表現ライブラリのスクリーニング.
- RBAP-1を特徴付けるための共同浄化アッセイ,タンパク質-タンパク質相互作用研究,DNA結合アッセイ.
主要な成果:
- RBAP-1をコードするcDNAがクローンされ,RBポケットに直接結合する.
- RBAP-1はE2Fと共浄化し,アデノウイルスE4ORF 6/7タンパク質と特異的に相互作用することが判明しました.
- RBAP-1はE2FのDNA認識配列に直接結合し,機能的なトランザクティベーションドメインを持っています.
結論:
- RBAP-1はE2Fの1種として特定されています.
- RBAP-1はRBポケットに特異的に結合し,RB媒介による細胞成長制御の役割を示唆する.
- この発見は,RB/E2F経路内の新しい相互作用と,ウイルスタンパク質によるその潜在的な調節を解明しています.
関連する概念動画
01:23Negative Regulator Molecules
Positive regulators allow a cell to advance through cell cycle checkpoints. Negative regulators have an equally important role as they terminate a cell’s progression through the cell cycle—or pause it—until the cell meets specific criteria.
02:35RACE - Rapid Amplification of cDNA Ends
Rapid Amplification of cDNA Ends, or RACE, is one of the most effective methods to obtain a full-length cDNA from an mRNA sequence between a known internal region to the unknown sequence at the 5’ or 3’ end. The unknown region is cloned in the cDNA by a gene-specific primer that binds the known end, and a hybrid primer that attaches a predefined anchor sequence to the unknown end of the cDNA. The sequence in between is amplified by PCR with an anchor primer and a gene-specific primer.
Since the...
Since the...
01:20The Retinoblastoma Gene
Tumor suppressor genes are normal genes that can slow down cell division, repair DNA mistakes, or program the cells for apoptosis in case of irreparable damage. Hence, they play an essential role in preventing the proliferation of damaged cells.
The first-ever tumor suppressor gene called Rb was identified in retinoblastoma - a rare eye tumor in children. In inherited forms of the disease, a child inherits one defective copy of the Rb gene, which predisposes them to retinoblastoma. However,...
The first-ever tumor suppressor gene called Rb was identified in retinoblastoma - a rare eye tumor in children. In inherited forms of the disease, a child inherits one defective copy of the Rb gene, which predisposes them to retinoblastoma. However,...
01:20The Retinoblastoma Gene
Tumor suppressor genes are normal genes that can slow down cell division, repair DNA mistakes, or program the cells for apoptosis in case of irreparable damage. Hence, they play an essential role in preventing the proliferation of damaged cells.
The first-ever tumor suppressor gene called Rb was identified in retinoblastoma - a rare eye tumor in children. In inherited forms of the disease, a child inherits one defective copy of the Rb gene, which predisposes them to retinoblastoma. However,...
The first-ever tumor suppressor gene called Rb was identified in retinoblastoma - a rare eye tumor in children. In inherited forms of the disease, a child inherits one defective copy of the Rb gene, which predisposes them to retinoblastoma. However,...