新しい光フォスホイソプレノイドを用いたタンパク質プレニルトランスファーゼ阻害剤の識別と特異性プロファイリング
Beatrice Dursina1, Reinhard Reents, Christine Delon
1Max-Planck-Institute for Molecular Physiology, Otto-Hahn-Strasse 11, 44227 Dortmund, Germany.
Journal of the American Chemical Society
|March 2, 2006
まとめ
研究者らは,酵素阻害剤を特定するために,タンパク質プレニルトランスフェラーゼ (FTase,GGTase-I,RabGGTase) に対する新しい光測定法を開発しました. これらのアッセイは,イソプレニル化を追跡することによって,がんやその他の疾患に対する薬剤発見を可能にします.
科学分野:
- バイオケミストリー バイオケミストリー
- 分子生物学は分子生物学である.
- ドラッグ・ディスカバリー・ドリッグ・ディスカバリー・ドリッグ・ディスカバリー・ドリッグ・ディスカバリー
背景:
- タンパク質のイソプレニル化は,FTase,GGTase-I,RabGGTaseによって媒介され,真核生物において極めて重要です.
- イソプレニル化阻害剤は,がん,ウイルス,寄生虫性疾患の治療の可能性を示しています.
- 一般的な非放射性アッセイの欠如は,阻害剤の識別を妨げています.
研究 の 目的:
- タンパク質プレニルトランスフェラーゼを研究するための新しい光測定法を開発する.
- FTase,GGTase-I,RabGGTaseの阻害剤を特定し,特徴づけること.
- 哺乳類の細胞における光イソプレノイドのインビボの役割を調査する.
主な方法:
- 光脂質ピロフォスファート類似体 (NBD-GPPおよびNBD-FPP) の合成.
- SDS-PAGEとビーズベースの in vitro プレニレーションアッセイの開発.
- 阻害研究と阻害剤結合メカニズムの分析.
- 哺乳類の細胞での細胞吸収およびin vivo組み込みの研究.
主要な成果:
- すべてのプレニルトランスフェラーゼに対する2つの単純な非放射性光測定法を開発し,検証しました.
- FTaseとGGTase-I.の潜在的な二重基板としてPRL-3を特定しました.
- RabGGTaseとFTaseに対するナノモラー親和性を有する阻害剤を発見し,複雑な阻害機構を明らかにした.
- 光イソプレノイドの細胞吸収と体内の組み込みが,小型のGTPasesに実証されています.
結論:
- 新しい光測定法により,プレニルトランスフェラーゼ阻害剤の効率的なスクリーニングが容易になります.
- この発見は,PRL-3基板特異性と阻害作用に関する新しい洞察を提供します.
- 開発された光イソプレノイドは, in vitro および in vivo でプレニレーションを研究するための貴重なツールです.
