分子クローニングとヒトFK506結合タンパク質FKBPの過剰発現

科学分野:

• 免疫学 免疫学とは
• 分子生物学は分子生物学である.
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• FK506は,臓器移植の拒絶を防ぐために重要な強力な免疫抑制剤です.
• FK506は,サイクロスポリンAと同様に,転写因子を調節することにより,T細胞活性化遺伝子転写を阻害する.
• FK506は,ペプチジルプロリルシストランスイソメラーゼであるFKBPに結合し,FK506によって強力に抑制されます.

研究 の 目的:

• 人間のFKBPの補完的なDNA (cDNA) とアミノ酸配列を決定する.
• エシェリキヤ大腸菌における活性,再結合ヒトFKBPの効率的な過剰発現を達成するために.
• 人間のFKBPを他のゲノムと比較することによって,潜在的な進化的または機能的なリンクを調査する.

主な方法:

• ジュルカット細胞からヒトFKBPをコードする補完DNA (cDNA) の分離と配列化.
• 過剰発現のためにEscherichia coliで再結合ヒトFKBPのクローン化と発現.
• 人間のFKBP配列を既存のゲノムデータベースと比較するためのバイオ情報分析.

主要な成果:

• 人間のFKBPのcDNAと派生アミノ酸配列が決定されました.
• 活性,再結合ヒトFKBPは,エシェリキア大腸菌で効率的に過剰発現していました.
• 人間のFKBPのcDNA配列は,Neisseria meningitidisのゲノムにおける開いた読み取りフレームと有意な類似性を示した.

結論:

• 免疫抑制剤FK506の重要な結合タンパク質であるヒトFKBPは,配列レベルで特徴づけられました.
• 再結合ヒトFKBPの過剰発現の成功は,さらなる生化学的および構造的研究を容易にする.
• 配列の類似性は,バクテリアを含む異なる種間でFKBPの保存された機能または進化的起源を示唆しています.