PICHはセントロメアに関連したSNF2ファミリーのATPaseであり,Plk1によって調節され,スパインドルのチェックポイントに必須である

科学分野:

• 細胞生物学 細胞生物学
• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝学 遺伝学とは

背景:

• スピンドル・アセンブリ・チェックポイント (SAC) は,すべての染色体がミトスピンドルに適切に結合するまで,アナフェーズの発生を防止することによって,正確な染色体分離を保証します.
• Plk1は,SAC調節と染色体分離を含むミトーシスの様々な段階に関与する重要なキナーゼです.

研究 の 目的:

• ミトの調節に関与するPlk1の新しい相互作用パートナーと基板を特定する.
• キネトコア-マイクロチューブル結合とスパインドルチェックポイントシグナリングにおけるPICHの機能を明らかにする.

主な方法:

• コイムノプレシピテーションは,Plk1相互作用タンパク質を識別する.
• ミトーシス中のPICH局所化を視覚化するための免疫光顕微鏡.
• RNA干渉 (RNAi) を用いて,PICHを減らし,染色体分離とスパインドルチェックポイントに及ぼす影響を評価する.
• PICHのリン酸化とDNA結合を分析するための生化学分析.

主要な成果:

• PICHは,SNF2 ATPaseファミリーのメンバーで,Plk1.1と相互作用し,Plk1.1によってリン酸化される.
• PICHはプロメタフェーズ中にキネトコアとセントロメアに局所化し,姉妹キネトコア間の張力依存性糸を形成する.
• PICHの枯渇は,キネトコアからMad2が失われ,スパインドルチェックポイントが廃止され,大量に染色体の不分化を引き起こします.
• PICH陽性糸は,DNaseに敏感で,コヘシン喪失またはトポイソメラーゼII阻害により悪化する,伸縮したセントロメリッククロマチンを表します.

結論:

• PICHは,スピンドルアセンブリチェックポイントの新規かつ不可欠なコンポーネントです.
• PICHは,姉妹キネトコア間の緊張を監視するために,セントロメリックDNAに結合して機能し,それによって正確な染色体分離を保証します.