ドロソフィラの条件付き遺伝子不活性化のための全ゲノムにわたるトランスジェニックRNAiライブラリ

科学分野:

• 遺伝学 遺伝学とは
• 分子生物学は分子生物学である.
• 発達生物学 発達生物学について

背景:

• モデル生物における前向き遺伝子スクリーンは,生物学的プロセスに関する重要な洞察をもたらしました.
• RNA媒介遺伝子干渉 (RNAi) を使用した逆遺伝子スクリーンは強力なツールですが,ゲノム全体のアプリケーションは,培養細胞または至るところに存在する遺伝子不活性化に限定されています.
• 健全な生物におけるRNAiを用いた組織特異的機能分析は,研究能力の大きなギャップとなっている.

研究 の 目的:

• 条件付き,組織特異的な遺伝子不活性化のためのDrosophila melanogasterの全ゲノムRNAiライブラリを作成する.
• 生物の生涯を通じて特定の組織における遺伝子機能の体系的な調査を可能にする.

主な方法:

• ドロソフィラ・メラノガスターRNAiトランスゲンの全ゲノムライブラリの生成は,逆転の繰り返しとしてクローンされた短い遺伝子断片を用いて行われます.
• 条件付き,組織特異的な遺伝子不活性化のためのバイナリGAL4/UASシステムによって制御されるRNAiトランスゲンの発現.
• 分子およびフェノタイプ分析によるトランスゲン機能の検証.

主要な成果:

• 22,270のトランスジェニック・ラインのライブラリが生成され,ドロソフィラの予測されたタンパク質コード遺伝子の88%をカバーしました.
• 生成されたRNAiトランスゲンのほとんどは,分子およびフェノタイプ分析を通じて機能的であることが確認されました.
• 図書館は,無傷のドロソフィラ生物の特定の組織における条件付きの遺伝子不活性化を促進します.

結論:

• 開発されたドロソフィラRNAiライブラリは,組織特有の機能的ゲノミクスの強力なプラットフォームを提供します.
• このリソースは,組織特異的なレベルで,発達,生理学,病理学の遺伝子機能を研究するための新しい道を開きます.
• この図書館は,複雑な多細胞生物における逆遺伝子スクリーニングの能力を大幅に向上させています.