INO80染色体改造複合体のMec1/Tel1リン酸化は,DNA損傷のチェックポイント応答に影響する

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 細胞生物学 細胞生物学
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• DNA損傷反応経路は,ゲノムの安定性を維持するために不可欠です.
• Mec1/Tel1キナーゼ (哺乳類のATM/ATR) は,DNA損傷反応の重要な調節体である.
• INO80のようなATP依存の染色体改造複合体は,DNA損傷反応に関与しているが,その調節は不明である.

研究 の 目的:

• DNA損傷反応におけるINO80染色体改造複合体の規制メカニズムを調査する.
• Mec1/Tel1キナーゼがINO80複合体を直接調節するかどうかを判断する.
• DNA損傷シグナル伝達におけるIes4サブユニットリン酸化の役割を明らかにする.

主な方法:

• イースト遺伝学と分子生物学技術.
• Ies4サブユニットのリン酸化部位変異.
• DNA修復とDNA損傷のチェックポイント現象の分析.
• タンパク質のリン酸化を検出するためのウェスタン・ブロッティング.

主要な成果:

• INO80複合体のIes4サブユニットは,DNA損傷時にMec1/Tel1キナーゼによってリン酸化される.
• Ies4のリン酸化部位における突然変異はDNA修復を阻害することはなかったが,DNA損傷チェックポイントの反応に影響を与えた.
• Ies4のリン酸化は,Tof1やRad53.3のようなチェックポイントレギュレータの機能と関連している.

結論:

• INO80染色体改造複合体は,Mec1/Tel1 DNA損傷シグナル伝達経路の機能的な構成要素である.
• 翻訳後の改変,特にIes4のリン酸化は,DNA損傷のチェックポイントにおけるクロマチンリモデレータの機能を調節する.
• この研究は,DNA損傷に対する反応としてクロマチンのリモデリング複合体の新しい規制機構を明らかにしています.