タンパク質セリン/スレオニンキナーゼをコードする遺伝子は,グラム陰性細菌であるM. xanthusの正常な発達のために必要である
J Muñoz-Dorado1, S Inouye, M Inouye
1Department of Biochemistry, University of Medicine and Dentistry of New Jersey, Robert Wood Johnson Medical School at Rutgers, Piscataway 08854.
M. xanthus のタンパク質セリン/スレオニンキナーゼ (pkn1) は,分化を調節する. その欠落は,早期発育を引き起こし,胞子産生を減少させ,適切な果実体の形成におけるその役割を強調する.
科学分野:
- 微生物学 微生物学とは
- 分子生物学は分子生物学である.
- バイオケミストリー バイオケミストリー
背景:
- Myxococcus xanthusは,多細胞果実体の形成を含む複雑な発達サイクルで知られている土壌細菌です.
- ユカリオットタンパク質のセリン/スレオニンキナーゼは,細胞過程の重要な調節因子ですが,細菌の発達におけるその役割はあまり理解されていません.
研究 の 目的:
- M. xanthus. の発達分化に関与するタンパク質キナーゼを特定し,特徴づけること.
- M. xanthusの発達における特定のセリン/スレオニンキナーゼ遺伝子 (pkn1) の機能を明らかにする.
主な方法:
- ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) は,M. xanthusのゲノムDNAから保存されたキナーゼ領域を拡大するために使用されました.
- クローン遺伝子 (pkn1) は,タンパク質分析のためにE. coliで過剰発現していた.
- 精製されたPkn1タンパク質にオートフォスフォリレーションアッセイが行われました.
- 遺伝子消去変異体は,発達のフェノタイプを研究するために作成されました.
主要な成果:
- 推定のタンパク質セリン/スレオニンキナーゼをコードする新しい遺伝子,pkn1が特定されました.
- Pkn1タンパク質は,セリンおよびセロニン残基に自己リン酸化活性を示した.
- pkn1の発現は,胞子形成に先立ち,発達的に調節されていることが判明しました.
- pkn1の削除は,早めの分化をもたらし,胞子産生を著しく低下させた.
結論:
- Pkn1タンパク質キナーゼは,M. xanthusの微分化の適切なタイミングと実行に不可欠です.
- Pkn1は,胞子形成につながる発達過程の発生を調節する上で重要な役割を果たします.
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11:45Fluorescence Live-cell Imaging of the Complete Vegetative Cell Cycle of the Slow-growing Social Bacterium Myxococcus xanthus
Published on: June 20, 2018
08:34Generation of In-Frame Gene Deletion Mutants in Pseudomonas aeruginosa and Testing for Virulence Attenuation in a Simple Mouse Model of Infection
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