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KGF受容体のexpression cDNAクローニングは,トランスフォーミングオトクリンループの作成によって行われる
T Miki1, T P Fleming, D P Bottaro
1Laboratory of Cellular and Molecular Biology, National Cancer Institute, Bethesda, MD 20892.
まとめ
研究者は,発現クローニングを使用して,ケラチノサイト成長因子 (KGF) 受容体cDNAを分離した. この方法は,KGFと酸性FGFに高い親和性を持つ新しいチロシンキナーゼ受容体を特定し,他のシグナル伝達経路に適用できます.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- 細胞シグナル伝達 細胞信号伝達
- 受容体チロシンキナゼは,受容体チロシンキナゼを
背景:
- ケラチノサイト成長因子 (KGF) は,上皮細胞特有のミトゲンである.
- KGF受容体を特定することは,上皮細胞の成長調節を理解するために重要である.
- 線維細胞成長因子 (FGF) は,細胞増殖と分化において重要な役割を果たします.
研究 の 目的:
- KGF受容体のための補完DNA (cDNA) を分離するための表現クローニング戦略を策定する.
- 隔離されたKGF受容体の結合特性と分子性質を特徴付ける.
主な方法:
- ケラチノサイト発現のcDNAライブラリを持つNIH/3T3線維芽細胞の感染.
- 変換された焦点の選択は,特定の高親和性KGF結合に基づいています.
- 関連する線維細胞成長因子 (FGF) との結合競争の分析.
- 受容体をコードする4.2キロ塩基cDNAの解剖と配列決定.
主要な成果:
- KGF受容体をコードする4.2キロ塩基cDNAの分離が成功しました.
- この受容体は,KGFと酸性FGFの両方に高親和結合を示す.
- 暗号化されたタンパク質は,膜を横断するチロシンキナーゼであり,基本的なFGF受容体とは関連しているが,異なる.
- 信号経路遺伝子を隔離するために,表現クローニングの有用性を実証した.
結論:
- 表現クローニング戦略は,成長因子受容体cDNAを分離するのに有効です.
- 特定されたKGF受容体は,広範囲のFGF結合特異性を持つ新しいチロシンキナーゼです.
- このアプローチは,ミトゲンシグナル伝達経路のステップを制限する遺伝子を特定するために広く適用できます.