人間のスプライシングファクターASFの主要な構造は,ドロソフィラ・レギュレータとの類似性を明らかにしています
H Ge1, P Zuo, J L Manley
1Department of Biological Sciences, Columbia University, New York, New York 10027.
Cell
|July 26, 1991
まとめ
研究者はASF-1cDNAを分離し,遺伝子のスプライシングを調節する代替スプライシング因子 (ASF) タンパク質をコーディングしました. 再結合ASFタンパク質は splicingと代替5'-splice-site選択を in vitroで活性化する.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- RNA スプライシングメカニズム
- 遺伝子規制 遺伝子規制
背景:
- 代替スプライシングファクター (ASF) は,以前に精製されたヒトタンパク質です.
- ASFは,SV40初期のプレ-mRNA.SV40における代替5'スプライスサイト利用を調節する.
研究 の 目的:
- ASF-1と呼ばれるASFタンパク質をコードするcDNAを分離する.
- ASF-1タンパク質とそのスプライシングにおける機能の特徴を述べる.
- ASFのプレ-mRNAの代替スプライシングを調査する.
主な方法:
- cDNAの分離とシーケンシング.
- 再結合タンパク質発現 (E. coli) とインビトロスプライシングアッセイ.
- ASFのプレ-mRNAスプライシングを研究するために追加のcDNAの分析.
主要な成果:
- 孤立したASF-1cDNAは,RNA結合ドメインとセリン/アルギニンに富んだC末端を持つ248アミノ酸タンパク質をコードする.
- 再結合ASF-1は splicingと代替5'-splice-site選択を in vitroで活性化する.
- ASFのプレ-mRNAは代替スプライシングを受け,ASF-2 mRNAを生成し,代替の読み取りフレームに翻訳されます.
結論:
- 隔離されたASF-1cDNAは,機能的な代替スプライシング因子をコードする.
- 再結合されたASFタンパク質は,スプライシングの活性化とスプライスサイトの切り替えに十分です.
- ASFのプレ-mRNAの代替スプライシングは,タンパク質発現に影響を及ぼす明確なmRNAアイソフォームを生成します.
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