鳥インフルエンザポリメラーゼPA(N) の結晶構造は,エンドヌクレアース活性部位を明らかにする
Puwei Yuan1, Mark Bartlam, Zhiyong Lou
1National Laboratory of Biomacromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China.
Nature
|February 6, 2009
まとめ
インフルエンザウイルスPAタンパク質 (PA(N)) のN末端ドメインは,ウイルスの複製に不可欠なエンドヌクレアース活性を持っています. この発見は,新しい抗インフルエンザ薬の開発の重要なターゲットとしてPA (((N) を特定しています.
科学分野:
- ウイルス学 ウイルス学 ウイルス学
- 構造生物学 構造生物学とは
- バイオケミストリー バイオケミストリー
背景:
- ヘテロトリメア型インフルエンザウイルスポリメラーゼ複合体 (PA,PB1,PB2) は,ウイルスのRNA複製と転写に不可欠です.
- PB1サブユニットは以前,エンドヌクレアース活性を持つと考えられていましたが,PB2はキャップ構造に結合します.
- PAタンパク質のN末端領域 (PA(N)) は,エンドヌクレアース活性を含む様々な機能に関与している.
研究 の 目的:
- 鳥インフルエンザH5N1ウイルスのPAタンパク質 (PA(N)) のN末端ドメインの結晶構造を決定する.
- PA(N) のエンドヌクレアース活性と,インフルエンザウイルスのポリメラーゼ機能におけるその役割を調査する.
- インフルエンザ治療薬の潜在的標的としてPA (N) を評価する.
主な方法:
- パイ (PA) の2.2 Å構造を決定するX線結晶学.
- 生物情報分析と,既知のエンドヌクレアースモチーフとの比較.
- 特定されたモチーフを分析するために,サイト・ディレクテッド・ミュータゲネシス.
- In vivo リボヌクレオプロテイン再構成アッセイ.
- インビトロエンドヌクレアースアッセイ.
主要な成果:
- PA(N) の結晶構造は,結合マグネシウムイオンを持つアルファ/ベータ構造を明らかにした.
- (P) DX (N) D/E (XK) エンドヌクレアースシグネチャーに似たモチーフは,PA (N) で特定されました.
- 変異性および機能的測定は,PB1ではなくPA(Nが,インフルエンザポリメラーゼ活性に重要なエンドヌクレアース活性部位を宿していることを確認しました.
- PA(N) のエンドヌクレアース活性部位は,インフルエンザ株全体で高度に保存されています.
結論:
- PAタンパク質 (PA(N)) のN端領域には,インフルエンザウイルスの複製に不可欠なエンドヌクレアース活性部位が含まれています.
- PA (N) は,インフルエンザウイルスのポリメラーゼのエンドヌクレアース活性において重要な役割を果たします.
- PA(N) エンドヌクレアース活性部位の保存された性質は,新しい抗インフルエンザ薬の開発の有望なターゲットにします.
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