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コカインに敏感なドーパミントランスポーターの補完DNAのクローン化と発現

S Shimada¹, S Kitayama, C L Lin

¹Laboratory of Molecular Neurobiology, National Institute on Drug Abuse, Baltimore, MD 21224.

Science (New York, N.Y.)

|October 25, 1991

まとめ

研究者らはネズミのドーパミントランスポーター補完DNAを分離し,ドーパミンの輸送におけるその機能を確認した. この発見は,神経伝達物質の輸送機構と潜在的な薬物相互作用を理解するのに役立ちます.

科学分野:

神経科学は神経科学である.
分子生物学は分子生物学である.
薬理学薬理学とは

背景:

ドーパミン (DA) は,様々な脳機能に関与する重要な神経伝達物質です.
ドーパミントランスポーター (DAT) の理解は,DA再吸収と神経疾患におけるその役割を理解するために不可欠です.
以前の研究では,DATの完全な分子理解が欠けていました.

研究の目的:

ネズミのドーパミントランスポーターをコードする補完DNA (cDNA) を分離し,特徴づけること.
孤立したDATの機能表現を確認するために.
発現されたDATの薬理学的性質を調査する.

主な方法:

DNAホモロジーのスクリーニングと発現ベースのアプローチが隔離のために使用されました.
機能的発現は,Xenopusの卵細胞とCOS細胞で検証されました.
コカインアナログ ([3H]CFT) を用いた放射性リンゴ結合測定は,感染した細胞膜で実施された.

主要な成果:

ネズミのドーパミントランスポーターcDNAを成功裏に分離し,619アミノ酸タンパク質をコードしました.
発現されたDATは,卵細胞とCOS細胞に [3H]ドーパミンを輸送する能力を示した.
[3H]CFTが発現したDATと結合する薬理学的分析は,ネイティブの状膜の分析を反映した.

結論:

単離されたラットのcDNAは,機能的なドーパミントランスポーターをコードする.
発現されたDATは,ネイティブDATと一致する薬理学的特性を表しています.
これは,ドーパミントランスポーターの機能と調節を研究するための貴重なツールを提供します.

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