フロレスセインは,ルテニウム-オクタールギニンの結合体を核に転送する
Cindy A Puckett1, Jacqueline K Barton
1Division of Chemistry and Chemical Engineering, California Institute of Technology, Pasadena, California 91125, USA.
Journal of the American Chemical Society
|June 10, 2009
まとめ
Ru-octaarginineのfluoresceinタグは,HeLa細胞の細胞吸収と局所化に影響する. タグは染色に必要な濃度を低下させ,その位置がタグ付けされていないペプチドを反映しないことを意味します.
科学分野:
- 細胞生物学 細胞生物学
- バイオケミストリー バイオケミストリー
- マテリアルサイエンス 材料科学
背景:
- 細胞の吸収と細胞内局所化は,薬物投与と生物学的研究において極めて重要です.
- ペプチド結合体は,標的の配送のために調査されていますが,それらの行動は,付加されたタグによって影響を受けることができます.
- ルテニウム (II) 複合体は,外部ラベルなしで追跡するための内在的な発光を提供します.
研究 の 目的:
- 付加されたフローレスセインタグと付加されたフローレスセインタグのないルテニウム(II) -オクタールギニン結合体の細胞の吸収と局所化を比較するために.
- 光素でタグ付けされた結合体の局所が,タグ付けされていない結合体の局所を正確に反映しているかどうかを判断する.
- 光セインタグが濃度に依存する細胞の侵入と分布に与える影響を調査する.
主な方法:
- Ru (II) 複合体の固有の光を利用して,吸収を直接観察する.
- Ru-octaarginine-fluoresceinとRu-octaarginineだけで治療されたHeLa細胞の光顕微鏡画像を比較する.
- 異なる濃度で細胞および細胞下の局所化 (細胞溶液,核,核球) を評価する.
主要な成果:
- Ru-octaarginine-fluoresceinは,より低い濃度でサイトゾール,核,および核球の拡散染色を示した.
- フロレスセインのないルオカタルギニンは,類似の濃度で点滴した細胞プラズマの標識のみを示した.
- タグ付けされていないRu-octaarginineの濃度の上昇は,細胞プラズマ,核,および核の染色を引き起こしました.
- 光セインタグは,拡散性サイトプラズマおよび核の侵入のための値濃度を下げました.
結論:
- フロレスセインをルオカタルギニンに添加すると,その細胞吸収と局所化パターンが著しく変化します.
- 光セインタグの存在は,広範囲に広がる細胞および核の分布に必要な濃度を低下させます.
- 光素に結合した結合体の局所化は,自由ペプチドの局所化の信頼できる指標ではありません.
- タグ付けされたバイオモレキュルの細胞局所データを解釈する際には注意が必要です.
