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Labeling DNA Probes03:31

Labeling DNA Probes

DNA probes are fragments of DNA labeled with a reporter tag to enable their detection or purification. The resulting labeled DNA probes can then hybridize to target nucleic acid sequences through complementary base-pairing, and may be used to recover or identify these regions.
Radioisotopes, fluorophores, or small molecule binding partners like biotin or digoxigenin, are the most widely used reporter tags for labeling DNA probes. These labels can be attached to the probe DNA molecule via...
Protein Dynamics in Living Cells01:19

Protein Dynamics in Living Cells

Different fluorescence-based techniques are used to study the protein dynamics in living cells. These techniques include FRAP, FRET, and PET.
Fluorescent recovery after photobleaching (FRAP) is a fluorescent-protein-based detection technique used to quantify protein movement rates within the cell. This method exposes a small portion of the cell to an intense laser beam. The laser beam causes permanent photobleaching of the fluorophore-tagged proteins in the exposed region. As the bleached...

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標識と放出のためのチオール選択性フルオロゲン探査機

Vu Hong1, Alexander A Kislukhin, M G Finn

  • 1Department of Chemistry, The Scripps Research Institute, 10550 North Torrey Pines Road, La Jolla, California 92037, USA.

Journal of the American Chemical Society
|July 23, 2009
PubMed
まとめ
この要約は機械生成です。

研究者らは,水溶液中のチオールの選択的およびフッ素性ラベリングのための新しい7-オキシノルボナジーン (OND) 探査機を開発しました. これらの探査機は,高い反応性を提供し,ペプチドとタンパク質のチオールを感度的に検出することができます.

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科学分野:

  • 化学生物学 化学生物学とは
  • 有機化学 オーガニック・ケミストリー
  • バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

  • チオールアルキレーションは,タンパク質のラベル付けに不可欠です.
  • 既存の方法は選択性が欠けているか,または特定の条件を必要とする可能性があります.
  • 効率的で汎用性の高いチオール反応性プローブの開発が必要である.

研究 の 目的:

  • 7-オキシノルボナジーン (OND) ベースのプローブの新しいクラスを導入する.
  • 中性pHの水溶液中のチオルの選択的,フッ素性ラベリングを達成するために.
  • 分裂機構と,その結果生成されるアダクトの多様性を探求する.

主な方法:

  • ダンシル・フッ素酸化物による7-オキシノルボナーディエン (OND) 誘導体の合成.
  • チオール添加運動と光増強の調査.
  • レトロ・ディエルス・アルダー分裂とサクシニミド形成の分析.
  • ペプチドおよびタンパク質におけるチオールの化学選択的ラベル付け.

主要な成果:

  • OND探査機は,高い反応性 (40-200 M(-1) s(-1)) とチオールに対する選択性を示しています.
  • チオールを加えると,光の強度は180倍まで増加します.
  • アドクトは,レトロ-ディエルス-アルダーまたはサクシニミド形成経由で割れ,アルコールの放出を可能にします.
  • タンパク質とペプチドをOND電ophilesでラベル付けすることに成功しました.

結論:

  • ONDフレームワークは,反応性およびフッ素性チオールプローブの開発のための多用途のプラットフォームを提供します.
  • これらの探査機は,生物学的システムにおけるチオールの感度のある検出とラベル付けを可能にします.
  • ONDリンクラーのモジュール化性質は,他の分子によるさらなる機能化と結合を可能にします.