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Real Time RT-PCR02:57

Real Time RT-PCR

Real-time reverse transcription-polymerase chain reaction, or Real-time RT-PCR, is an analytical tool used to determine the expression level of target genes. The method involves converting mRNA to complementary DNA with the help of an enzyme known as reverse transcriptase, followed by the PCR amplification of the cDNA. These two processes can be performed simultaneously in a single tube or separately as a two-step reaction.
The real-time quantification of the number of amplified products is...

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テンプレート付きの還元クエンチャーリリースによる効率的な核酸検出.

Raphael M Franzini1, Eric T Kool

  • 1Department of Chemistry, Stanford University, Stanford, California 94305-5080, USA.

Journal of the American Chemical Society
|November 6, 2009
PubMed
まとめ

新しいQ-STAR探査機は,迅速で敏感で特定の核酸検出を可能にします. この光活性化戦略は,遺伝情報の視覚的識別を可能にし,単一のヌクレオチドの違いによってバクテリア種を区別することもできます.

科学分野:

  • バイオケミストリー バイオケミストリー
  • 分子生物学は分子生物学である.
  • アナリティカル・ケミストリー (Analytical Chemistry) とは

背景:

  • 核酸検出は,診断と研究において極めて重要です.
  • 現在の方法は時間がかかり,または感度が欠如する可能性があります.
  • 生体細胞における直接的な視覚的検出は,依然として課題です.

研究 の 目的:

  • 新しいRNAテンプレート型光活性化戦略を開発する.
  • 核酸検出のための非常に敏感で特定のDNAプローブを作成する.
  • 遺伝子素材の直接視覚的検出を in vitro および in cells で可能にします.

主な方法:

  • "Q-STAR" (Quenching-release by STARting a Reduction) 探査機の設計と合成について.
  • 光活性化のためにアジドを含むリンカーのフォスフィン誘発的還元を使用します.
  • バクテリアの16S rRNAと単一ヌクレオチドのポリモルフィズム差別を用いた探査機の性能を実証する.

主要な成果:

  • Q-STAR探査機は,20分以内に強力な光点火信号を達成しました.
  • システムは,非常に低い背景騒音と有意な信号増幅を示した.

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  • 緑色/赤色のプローブペアは,16S.rRNAの単一のヌクレオチドの違いに基づいてバクテリア種を成功裏に微分化しました.

    • 結論:

    • 還元クンチャー放出メカニズムは,光活性化のための堅牢な方法を提供します.
    • Q-STAR探査機は,敏感で特異的な核酸検出のための有望なプラットフォームを提供します.
    • この技術は,分子診断と生細胞画像の応用に広大な可能性を秘めています.