ダイメチルアルギニン・ダイメチラミノヒドロラゼの in vivo 活動探査を介したクリック化学による検出です
Yun Wang1, Shougang Hu, Walter Fast
1Division of Medicinal Chemistry, University of Texas, Austin, Texas 78712, USA.
Journal of the American Chemical Society
|November 19, 2009
まとめ
研究者は,ダイメチルアルギニン・ダイメチラミノヒドロラゼ-1 (DDAH-1) を研究するための新しい活動ベースのプローブを開発しました. このツールは,心血管疾患と内皮機能不全を理解するために不可欠なDDAH-1の活動を分析するのに役立ちます.
科学分野:
- バイオケミストリー バイオケミストリー
- 分子生物学は分子生物学である.
- 心血管研究 循環器科の研究
背景:
- 非対称なN ((omega),N ((omega) -ディメチル-l-アルギニン (ADMA) は,内在的な酸化窒素合成酵素阻害剤であり,心血管疾患のバイオマーカーである.
- ディメチラルギニン・ディメチラミノヒドローラゼ (DDAH) の同型はADMAレベルを調節する;DDHAHの調節不全は内皮機能障害に寄与する.
研究 の 目的:
- DDAH-1酵素活性を研究するための新しい活動ベースのプローブを開発し,検証する.
- 様々な生理学的および病理学的条件下でDDAH-1を分析するためのツールを提供すること.
主な方法:
- 2部構成の,クリック化学による活動ベースのプローブ (N-but-3-ynyl-2-chloroacetamidine) が合成されました.
- 探査機は,HEK 293T細胞にミクタグされたDDAH-1をラベルするために使用されました.
- 2色のウエスタン・ブラッティングにより,DDAH-1阻害剤のインビボIC (in vivo IC) が決定されました.
主要な成果:
- 探査機は,活性DDAH-1を成功裏に標識したが,不活性変異体や阻害された酵素を標識することはできなかった.
- この研究では,逆戻り可能なDDAH-1阻害剤のインビボIC (in vivo IC) を決定し,その生物学的利用可能性と活性部位の競争性を確認しました.
- 開発された探査機は,DDAH-1の活動を分析するのに有効です.
結論:
- DDAH-1のための新しいクリック化学ベースのアクティビティベースの探査機が開発されました.
- この探査機は,健康と病気におけるDDAH-1の機能を調査するための貴重なツールです.
- この探査機を用いたさらなる研究は,内皮機能不全と心血管疾患の病因におけるDDAH-1の役割を明らかにすることができます.
