高通量スクリーニングは,p38alphaの非活性キナーゼ構成を安定させるインヒビターを特定するために行われます

科学分野:

• 薬用化学 薬用化学について
• 化学生物学 化学生物学とは
• 構造生物学 構造生物学とは

背景:

• キナーゼ阻害剤は,研究におけるキナーゼ活性を調節するために重要である.
• 伝統的な高通量スクリーニング (HTS) は,しばしばATP-競争性型I型阻害剤のみを特定します.
• キナーゼの機能は,活性型と非活性型との間の構造的移行に依存しています.

研究 の 目的:

• 特定の形状をターゲットとするキナーゼ阻害剤を特定するための新しいHTSアッセイを開発する.
• 酵素的に不活性なp38alpha MAPキナーゼを用いた小分子ライブラリをスクリーニングする.
• 薬理学的に望ましいDFG-out形状の安定剤を発見する.

主な方法:

• ~35,000個の小さな有機分子の高通量スクリーニング.
• 酵素学的に不活性なヒトp38alpha MAPキナーゼを用いた測定システムを使用した.
• タンパク質X線結晶学で,ヒット化合物の結合モードを決定する.

主要な成果:

• p38alpha MAPキナーゼのDFG-outコンフォーメーションを安定化または誘導する小分子が特定されました.
• 構造的特徴は,ヒット化合物がキナーゼとどのように相互作用するかを明らかにした.
• いくつかの検証されたヒット化合物は,従来のリン酸化アッセイで検出されなかった.

結論:

• 不活性キナーゼ製剤によるスクリーニングは,阻害剤発見のためのユニークな感度を提供します.
• 開発されたアッセイシステムは,古典的な方法では見逃された新種のキナーゼ阻害剤を成功裏に特定しています.
• このアプローチは,薬理学的に重要なキナーゼ調節剤の発見の可能性を拡大します.