循環変異と半合成を用いたp300/CBPヒストンアセチルトランスフェラーゼ調節の分析
Kannan R Karukurichi1, Ling Wang, Lerna Uzasci
1Department of Pharmacology and Molecular Sciences, Johns Hopkins School of Medicine, Baltimore, Maryland 21205, USA.
Journal of the American Chemical Society
|January 13, 2010
まとめ
ヒストンアセチルトランスフェラーゼ (HAT) p300/CBPの活動は,オートアセチル化によって調節されます. この研究はp300/CBPを化学的に改変し,アセチル化の増加がHATの活性を増強し,タンパク質の調節に関する新しい洞察を提供することを明らかにしました.
科学分野:
- バイオケミストリー バイオケミストリー
- 分子生物学は分子生物学である.
- エピジェネティクス エピジェネティクス
背景:
- ヒストンアセチルトランスフェラーゼ (HAT) p300/CBPは,遺伝子調節において重要な役割を果たしています.
- p300/CBPはライシン残基にオートアセチル化され,その活動を調節することが提案されています.
- 特定のオートアセチル化部位の正確な役割を理解することは,p300/CBPの機能を明らかにするために不可欠です.
研究 の 目的:
- サイト特有のp300/CBPの化学アセチル化のための方法を開発する.
- 定義されたオートアセチル化部位がp300/CBP HAT活性に与える影響を調査する.
- タンパク質尋問のための発現タンパク質結合と円周パルムテーションの有用性を探求する.
主な方法:
- 循環変異と発現タンパク質結合の組み合わせを使用して,半合成p300/CBPタンパク質を作成しました.
- p300/CBP HAT ドメイン内の最大6つの既知の部位にアセチルライシン改変が導入されました.
- 改変されたタンパク質のアセチル-コア基板アナログへの結合親和性を評価し,HAT活性を測定しました.
主要な成果:
- 半合成で循環的に変異されたアセチル化p300/CBPタンパク質は,アセチル-CoA基板アナログに対する高い親和性を維持しました.
- HATの活動は,アセチル化の度合いと正に相関することが判明しました.
- サイト固有のオートアセチル化がp300/CBP HAT活性に直接影響することを示した.
結論:
- サイト固有のオートアセチル化がp300/CBP HAT活性を制御するという新しい証拠を提供します.
- 内部タンパク質領域を研究するために,発現タンパク質結合と円周パルムテーションを使用して,潜在的に一般化可能な戦略を強調しています.
- p300/CBPによって媒介されるエピジェネティック・レギュレーションの理解を進める.
