潜在的にNF-kappa Bの65kDサブユニットをコードするrel関連ヒトcDNAの分離
関連する実験動画
S M Ruben1, P J Dillon, R Schreck
1Department of Molecular Oncology and Virology, Roche Institute of Molecular Biology, Roche Research Center, Nutley, NJ 07110-1199.
まとめ
研究者らは,ヒトリンパ球で新しい65キロダルトンのタンパク質を特定した. このタンパク質は,c-relプロトオンコゲンに関連しており,活性核因子カッパB (NF-カッパB) 転写因子複合体のp65サブユニットである可能性があります.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- 免疫学 免疫学とは
- 遺伝学 遺伝学とは
背景:
- プロトオンコゲンであるc-rel,Drosophila dorsal,およびNF-kappa B p50サブユニットは,保存ドメインを共有しています.
- NF-kappa Bは,免疫反応における重要な転写因子である.
研究 の 目的:
- NF-kappa Bシグナル伝達に関与する新しいrel-ファミリーのタンパク質を特定し,特徴づけること.
- 新しく特定されたRel関連タンパク質のTおよびBリンパ球における役割を調査する.
主な方法:
- ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) と変性オリゴヌクレオチドは,DNAプローブを生成するために使用されました.
- 補完DNA (cDNA) ハイブリダイゼーションにより,リンパ球内の2.6キロベースメッセンジャーRNA (mRNA) が特定されました.
- In vitroの転写と翻訳は,機能分析のために65キロダルトン (kD) のタンパク質を生成しました.
主要な成果:
- 65kDのタンパク質は,カッパBモチーフに特異的な弱いDNA結合を示した.
- 結合は,p65 NF-kappa Bサブユニットに類似した,I kappa B-alphaおよび-betaタンパク質によって抑制されました.
- 65kDのタンパク質は,NF-カッパBp50サブユニットと関連し,NF-カッパB-DNA複合体と同一の電泳運動性を有する複合体を形成します.
結論:
- 特定された65kDのrel関連タンパク質は,活性NF-カッパB転写因子のp65サブユニットである可能性が高い.
- この発見は,NF-カッパB複合体の構成と調節を理解するのに役立ちます.