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RNAポリメラーゼII転写の活性化に必要な媒介体 in vitro

P M Flanagan¹, R J Kelleher, M H Sayre

¹Department of Cell Biology, Fairchild Center, Stanford University School of Medicine, California 94305.

|April 4, 1991

まとめ

アクティベータータンパク質は,一般の開始因子ではなく,新しい媒介分子と相互作用することによって転写を刺激します. このメディエーターは,インビトロでアクティベーター機能に不可欠であり,遺伝子調節における重要な役割を果たしていることを示しています.

科学分野:

分子生物学は分子生物学である.
遺伝子発現の規制について

背景:

アクティベータータンパク質は,DNAエンハンサーを結合することによって転写を強化する.
提案されたメカニズムは,アクティベーターが一般的開始因子または中間分子と相互作用することを示唆しています.

研究の目的:

活性化媒介による転写における潜在的な中間分子 (媒介子) の役割を調査する.
この仲介者の存在と機能の直接的な証拠を提供すること.

主な方法:

共通のターゲット要因を検出するためにアクティベーターの干渉 ("スキャッチング") を利用しました.
活性化器の干渉に対する部分的に浄化された酵母分子の効果を評価した.
特定のアクティベーター (GAL4-VP16,GCN4) によってインビトロ転写刺激のためのメディエーターの必要性を実証した.

主要な成果:

アクティベーターの干渉は,過剰な一般的開始因子によって緩和されず,明確なターゲットを示唆しています.
部分的に浄化された酵母分子はアクティベーターの干渉を逆転させ,媒介者の存在を示した.
直接的な証拠は,アクティベータ刺激による転写にはメディエーターが必要ですが,基礎転写には必要ないことを示しました.

結論:

一般的な開始因子とは分離した明確なメディエーター分子は,転写におけるアクティベータータンパク質機能に不可欠である.
この媒介体は,アクティベータータンパク質と基礎転写機構との橋渡しにおいて重要な役割を果たします.

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