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インターレウキン-1受容体の抗体タンパク質の浄化,クローン化,発現および生物学的特徴付け

D B Carter¹, M R Deibel, C J Dunn

¹Department of Molecular Biology Research, Upjohn Company, Kalamazoo, Michigan 49007.

|April 12, 1990

まとめ

研究者らは,インタールイキン-1 (IL-1) 受容器対抗性タンパク質 (IRAP) を分離し,配列化した. リコンビナンスのIRAPは,インビトロおよびインビボにおいてIL-1活性を効果的に阻害し,IL-1阻害剤としての潜在能力を示しました.

科学分野:

免疫学免疫学とは
分子生物学は分子生物学である.
細胞生物学細胞生物学

背景:

インターリューキン-1 (IL-1) は,炎症反応と免疫反応に関与する重要なサイトカインです.
IL-1受容体対抗タンパク質 (IRAP) は,自然に発生するIL-1の阻害剤です.
IRAPの機能と生産を理解することは,標的治療の開発に不可欠です.

研究の目的:

ヒトの細胞系からインタールイキン-1 (IL-1) 受容器抗原タンパク質 (IRAP) を精製し,特徴づけること.
IRAP.をコードする補完DNA (cDNA) をクローンして配列化する.
再結合IRAPを発現させ,IL-1に対するその抑制活性を評価する.

主な方法:

U937細胞からのIRAPの浄化と部分シーケンシング.
IRAPをコードするcDNAのクローニングとシーケンシング.
エシェリキヤ大腸における再結合IRAPの発現.
IL-1結合の抑制と生物活性を測定するインビトロ測定法.
IL-1誘発のコルチコステロン生成の抑制を評価するインビボ試験.

主要な成果:

IRAPは,U937ヒトミエロモノサイト細胞系から成功裏に浄化されました.
IRAPをコードするcDNAはクローンされ,配列が決定されました.
再結合IRAPは,IL-1の受容体への結合を競争力的に抑制しました.
再結合IRAPは,T細胞と内皮細胞におけるIL-1の生物活性を特定抑制することを in vitroで実証した.
再結合IRAPは,IL-1誘発のコルチコステロンの産生を in vivoで強力に抑制しました.

結論:

この研究では,機能的な再結合型IRAPを成功裏に特徴付け,生成しました.
リコンビナントIRAPは,インビトロとインビボの両方でIL-1活動の効果的な阻害剤です.
IRAPは,IL-1によって媒介される疾患に対する有望な治療目標です.

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