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Experimental RNAi02:15

Experimental RNAi

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RNA interference (RNAi) is a cellular mechanism that inhibits gene expression by suppressing its transcription or activating the RNA degradation process. The mechanism was discovered by Andrew Fire and Craig Mello in 1998 in plants. Today, it is observed in almost all eukaryotes, including protozoa, flies, nematodes, insects, parasites, and mammals. This precise cellular mechanism of gene silencing has been developed into a technique that provides an efficient way to identify and determine the...
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In-vitro Mutagenesis01:16

In-vitro Mutagenesis

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To learn more about the function of a gene, researchers can observe what happens when the gene is inactivated or “knocked out,” by creating genetically engineered knockout animals. Knockout mice have been particularly useful as models for human diseases such as cancer, Parkinson’s disease, and diabetes.
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RNA Interference01:23

RNA Interference

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RNA interference (RNAi) is a process in which a small non-coding RNA molecule blocks the post-transcriptional expression of a gene by binding to its messenger RNA (mRNA) and preventing the protein from being translated.
This process occurs naturally in cells, often through the activity of genomically-encoded microRNAs. Researchers can take advantage of this mechanism by introducing synthetic RNAs to deactivate specific genes for research or therapeutic purposes. For example, RNAi could be used...
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条件付きRNA干渉を用いたマウスの遺伝子機能を研究するための迅速かつスケーラブルなシステム.

Prem K Premsrirut1, Lukas E Dow, Sang Yong Kim

  • 1Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY 11724, USA.

Cell
|April 5, 2011
PubMed
まとめ
この要約は機械生成です。

私たちは,RNAiトランスジェニックマウスを生成するための迅速でスケーラブルなパイプラインを開発しました. この方法は強力な遺伝子静止を可能にし,がんの治療標的を特定し,研究を加速します.

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科学分野:

  • 遺伝学 遺伝学とは
  • 分子生物学は分子生物学である.
  • バイオテクノロジー バイオテクノロジー

背景:

  • 遺伝子関数研究において,RNAiトランスジェニックマウスの再生可能な生成は極めて重要であるが,依然として重要な制限である.
  • RNA干渉 (RNAi) は,遺伝子サイレンシングのための強力なアプローチを提供します.
  • RNAiトランスジェニックマウスを作るための既存の方法は,しばしば遅いものであり,容易にスケーラブルできません.

研究 の 目的:

  • shRNAトランスジェニックマウスを生産するための迅速でスケーラブルで費用対効果の高いパイプラインを開発する.
  • 遺伝子サイレンシングのための開発されたシステムの有効性を in vivo で実証するために.
  • RNAiテクノロジーを用いてがんにおける潜在的な治療標的を特定する.

主な方法:

  • 高効率のES細胞ターゲティングを備えた,最適化された光結合miR30ベースのshRNAを組み合わせた.
  • 鍵となる遺伝子 (ルシフェラーゼ,Oct4,p53,p16INK4a,p19ARF,APC) を標的とした8つのテト調節されたshRNAトランスジェニックマウスラインを生成した.
  • 様々な組織における遺伝子ノックダウンを視覚化および定量化するためにGFPトラッキングを利用した.

主要な成果:

  • 強力な遺伝子静止と,GFPが追跡したノックダウンを,幅広い組織で,in vivoで達成した.
  • APCを例として,遺伝子の既知の機能と新しい機能を識別するシステムの能力を実証した.
  • T細胞急性リンパ性白血病/リンパ腫および肺腺がんにおける潜在的な治療標的として,検証されたAPC/Wntおよびp19ARF.

結論:

  • 開発されたパイプラインは,哺乳類の遺伝子をターゲットとするRNAiトランスジェニックマウスを生産するための費用対効果の高いスケーラブルなプラットフォームを提供します.
  • このシステムは,遺伝子機能の研究を大幅に前進させ,治療目標の発見を容易にする.
  • この技術は,がん生物学や薬物開発を含む様々な分野における研究を加速させるための有望な可能性を秘めています.