分子クローニングとヒト腫瘍死滅因子の受容体の発現
T J Schall1, M Lewis, K J Koller
1Department of Molecular Biology, Genentech, Inc., South San Francisco, California 94080.
研究者らは,がん患者の血清に溶解性腫瘍死滅因子 (TNF) 結合タンパク質を特定した. このタンパク質は,TNF受容体 (TNF-R) から派生している可能性があり,TNFシグナル伝達に不可欠な細胞表面分子です.
科学分野:
- 免疫学 免疫学とは
- 分子生物学は分子生物学である.
- バイオケミストリー バイオケミストリー
背景:
- 腫瘍死滅因子 (TNF) は,炎症と免疫に関与する重要なサイトカインです.
- 溶性TNF結合タンパク質は,がん患者の血清で検出されているが,その起源は不明である.
研究 の 目的:
- 血清からヒトのTNF結合タンパク質を精製し,特徴づけること.
- この結合タンパク質をコードする遺伝子を特定し,TNF受容体との関係を明らかにする.
主な方法:
- タンパク質の浄化と部分シーケンシング.
- オリゴヌクレオチドによる誘導性突然変異とcDNAクローニング.
- 哺乳類の細胞変異と受容体結合検査.
- ノーザン・ブロット分析.
主要な成果:
- 同質なTNF結合タンパク質が,がん患者の血清から浄化されました.
- TNF受容体 (TNF-R) をコードするcDNAクローンが分離されました.
- TNF-Rは415アミノ酸のトランスメブランタンパク質で,NGF受容体と同型である.
- TNF-Rを発現する感染した細胞は,TNF-alphaに特異的に結合し,この結合は,標識されていないTNF-alphaとTNF-betaによって抑制されました.
- 北部の分析では,さまざまな細胞タイプに1つのTNF-RmRNA種が発見されました.
結論:
- 人間の血清に含まれる溶解性TNF結合タンパク質は,TNF受容体のタンパク質分解的に放出された断片である可能性が高い.
- この発見は,癌患者の溶解性TNF結合タンパク質の存在に分子的基礎を提供し,TNF媒介シグナル伝達にも影響を及ぼしています.
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