S. cerevisiaeにおける第3の必須DNAポリメラーゼである.

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝学 遺伝学とは
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• DNAポリメラーゼIとIIIは,Saccharomyces cerevisiae (酵母) の生存に不可欠であることが知られている.
• イーストの複製におけるDNAポリメラーゼIIなどの他の核DNAポリメラーゼの役割と本質は,まだあまり理解されていない.

研究 の 目的:

• イーストDNAポリメラーゼIIの触媒サブユニットをコードするPOL2遺伝子をクローン化し,分析する.
• 酵母細胞の生存能力とDNA複製のためのDNAポリメラーゼIIの必須性を決定する.

主な方法:

• S. cerevisiaeの遺伝子クローニングとPOL2の分析.
• POL2 mRNAのサイズを決定するトランスクリプト分析.
• 分子重量を予測し,機能ドメインを特定するためのタンパク質配列分析.
• 細胞の生存能力とDNAポリメラーゼ活性への影響を評価するための遺伝子破壊および削除実験.

主要な成果:

• POL2遺伝子はクローンされ,255,649Mrタンパク質をコードする7.5kbのトランスクリプトを表現することが判明しました.
• POL2の部分的な破壊は,断絶されたDNAポリメラーゼIIの活性を持つ生存可能な細胞をもたらした.
• POL2の読み取りフレームを完全に削除すると,生命不可能な状態と特徴的なDNA複製停止形態が生まれました.
• 予測されたタンパク質のN端領域は,他の真核DNAポリメラーゼと限られた配列類似性を示した.

結論:

• 三つの核DNAポリメラーゼ (I,II,III) は,S. cerevisiaeの生命力にとって不可欠である.
• DNAポリメラーゼIIは,DNA複製において重要な役割を果たし,おそらくレプリケージとして機能する.
• 複製体としての3つのDNAポリメラーゼの本質性は,ユカリオットDNA複製の既存のモデルに挑戦しています.