ユーカリオットの起源に依存するDNA複製は,DDKとS-CDKキナーゼの連続的な作用を in vitroで明らかにしています

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 細胞生物学 細胞生物学
• 遺伝学 遺伝学とは

背景:

• ユカリオットDNAの複製は複雑なプロセスです.
• ヘリコースの負荷,活性化,およびレプリソームの組み立ての時間的な分離は極めて重要です.
• 複製開始の調節を理解することは,細胞サイクル制御の鍵です.

研究 の 目的:

• ユカリオットDNA複製の開始の制御メカニズムを調査する.
• 複製におけるDbf4依存Cdc7キナーゼ (DDK) とS相サイクリン依存キナーゼ (S-CDK) の異なる役割を解明する.
• オリジンの発射とリプリソームの組み立ての間の一連の出来事を定義する.

主な方法:

• ユカリオット起源に依存する複製の開始のための in vitro 測定を用いた.
• 複製のダイナミクスを観察するために,in vivo研究を行いました.
• Sld3,Cdc45,GINS,DNAポリメラーゼなどの重要なタンパク質の採用を調査した.

主要な成果:

• S-CDKではなくDDKが,ヘリケイズ負荷後のSld3とCdc45の初期発生徴募に必要である.
• In vivoでは,DDKは,S-CDKの活性化前にCdc45の早期発射起源の徴募を駆動する.
• S-CDKの活性化により,GINSと残りのレプリソームの採用が容易になります.
• 遅れた鎖のDNAポリメラーゼの募集は,先導鎖の募集とは異なり,Mcm10とDNAの解き放たれに依存しています.

結論:

• DDKとS-CDKは,ヘリカーゼの活性化とレプリソームの組み立てを調節する上で,それぞれ異なる,連続的な役割を担っています.
• リードストランドDNAポリメラーゼが,原始DNA解離とRNAプライマー合成の前に採用されるモデルがサポートされています.
• この研究は,正確なDNA複製の開始に不可欠な出来事の時間的な順序を明確にします.