RNAポリメラーゼII C-ターミナルの反復は,転写強化器の信号に対する反応に影響する

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• イースト遺伝学 イースト遺伝学
• 遺伝子規制 遺伝子規制

背景:

• RNAポリメラーゼII大サブユニットは,ヘプタペプチドの繰り返しからなる保存されたC端末ドメイン (CTD) を有する.
• CTDの繰り返しの数は,Saccharomyces cerevisiaeの細胞生存能力と成長条件に大きな影響を与えます.
• CTDの断絶は,タンパク質の不安定性ではなく,機能的欠陥と関連しています.

研究 の 目的:

• RNAポリメラーゼIICTDにおけるヘプタペプチドの繰り返しの数を変化させることによる機能的影響を調査する.
• CTDの繰り返し数が,酵母プロモーターにおける上流の活性化シーケンスに対する反応にどのように影響するかを決定する.
• CTDの断片に敏感な特定の規制要素を特定する.

主な方法:

• Saccharomyces cerevisiaeをモデル生物として利用する.
• RNAポリメラーゼIICTDに部分消去変異を導入する.
• 細胞の生存能力,成長フェノタイプ (温度および寒さに対する感受性),およびイノシトールオクストロフィーの評価.
• GAL4結合部位を含む特定のプロモーターのアップストリーム活性化配列に反応する酵素の能力を分析する.

主要な成果:

• 10回未満のCTDリピートが欠けている酵母細胞は,無効である.
• 10〜12回のCTD繰り返しの細胞は,温度感受性および寒さ感受性成長を示し,イノシトールオクストロフです.
• 部分的なCTD欠損は,プロモーター特異的な方法で,上流の活性化配列に対するRNAポリメラーゼII酵素の反応を損なう.
• GAL4結合部位はCTD切断に敏感であり,CTDの繰り返し番号が特定の転写因子に対する応答を媒介する役割を果たしていることを示している.

結論:

• RNAポリメラーゼIICTDにおけるヘプタペプチドの繰り返し数は,細胞の生存能力と酵母における遺伝子発現の適切な調節の両方にとって重要である.
• CTDの長さは,規制要素との酵素の相互作用を調節することによって,プロモーター活性化の効率に直接影響を与えます.
• これらの発見は,真核細胞の転写におけるCTD構造-機能関係の重要性を強調しています.