効率的な TATA ボックス結合と TFIID の in vitro 機能に必要な下流のイニシアチブ エレメントです

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝子規制 遺伝子規制
• 神経科学は神経科学である.

背景:

• 膠質繊維酸性タンパク質 (gfa) 遺伝子は,膠質細胞の重要な中間線維タンパク質をコードする.
• プロモーター分析により,ヒトのgfa遺伝子には2つの異なるイニシアチブ要素が明らかになった:TATAボックスと下流のイニシアチブ要素.

研究 の 目的:

• 転写におけるgfaプロモーターのTATAボックスと下流のイニシアター要素の機能的役割を調査する.
• 自然人TFIIDおよびクローンTFIIDのこれらのプロモーター要素への結合特性を特徴づける.

主な方法:

• トランスフェクションアッセイは,培養細胞での転写のためのプロモーター要素の要件を評価するために使用されました.
• 検査室内転写アッセイとDNaseフットプリントは,部分的に浄化された天然ヒトTFIIDと,細菌で発現したクローンTFIIDで実施した.
• gfaプロモーターの削除分析が行われました.

主要な成果:

• TATAボックスとダウンストリームイニシアター要素は,効率的なgfa遺伝子転写に不可欠です.
• ヒトの天然のTFIIDは,TATAボックスとダウンストリームイニシアターの両方に結合し,ヒトのクローンおよび酵母TFIIDは,主にTATAボックスに結合する.
• ダウンストリームイニシアターの削除により,TATAボックスへのTFIID結合が損なわれ,転写が減少しました.
• クローンされたTFIIDは,TATAボックス・バインディングとトランスクリプションのダウンストリーム・イニシアターへの依存度が低いことを示した.

結論:

• gfa遺伝子の効率的な転写には,TATAボックスとダウンストリームイニシアターの協力的作用が必要です.
• ヒトの天然のTFIIDには,下流のイニシアターと相互作用し,TFIIDの結合を安定させ,転写を促進する追加の成分がある可能性が高い.