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寄生虫原生動物における遺伝子置換

A Cruz1, S M Beverley

  • 1Department of Biological Chemistry and Molecular Pharmacology, Harvard Medical School, Boston, Massachusetts 02115.

Nature
|November 8, 1990
PubMed
まとめ

リーシュマニア・マジャーのホモロゴスな遺伝子ターゲティングは,機能的な遺伝子研究を可能にします. この方法は,寄生虫の遺伝子を効率的に置き換え,トライパノソマチド原生虫によって引き起こされる疾患の研究を支援します.

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科学分野:

  • 寄生虫学とは,寄生虫学である.
  • 分子生物学は分子生物学である.
  • 遺伝学 遺伝学とは

背景:

  • トリパノソマチド原生虫は,ヒトに重大な病気を引き起こす.
  • 分子の伝染サイクルにおける機能を特定することは困難です.
  • 遺伝子機能の検証は,これらの病原体を理解する上で極めて重要です.

研究 の 目的:

  • 機能的ゲノミクスの方法として,Leishmania majorにおける同類の遺伝子ターゲティングを確立する.
  • 遺伝子の破壊に対する同類再結合の効率をテストする.
  • 化学療法研究のために,ダイヒドロフォラート還元酵素-チミジラート合成酵素 (DHFR-TS) が不足しているリーシュマニアの主要な線を生成する.

主な方法:

  • ディヒドロフォラート還元酵素-チミジラート合成酵素 (dhfr-ts) 付近配列を用いた遺伝子ターゲティングコンストクトの開発.
  • 建築物とのライシュマニア・マジャーの感染.
  • ネオミシン・フォスフォトランスフェラーゼを用いた再結合寄生虫の選択.
  • ヘテロジゴスな削除ラインの生成と,その後の残りのdhrf-tのコピー.コピーの置き換え.

主要な成果:

  • 同性遺伝子の置換は,コロニーの45%で発生し,DNA量が少ない場合,ほぼ100%に増加しました.
  • リーシュマニアの統合的変異は,酵母に似た同類の再結合の高頻度を示した.
  • 機能的にDHFR-TSに欠陥のあるリーシュマニアの主要な線が成功裏に生成されました.

結論:

  • 同性遺伝子のターゲティングは,リーシュマニアの機能的ゲノミクスのための強力で効率的なツールです.
  • この方法は,トライパノソマチドの重要な遺伝子と薬物標的の研究を容易にする.
  • ホモログ的再結合の高頻度は,実質的にすべての寄生虫の遺伝子を完全に置き換えることを可能にします.