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遺伝子のターゲティングは,正常な細胞系と増幅された細胞系にある.
1Verna and Marrs McLean Department of Biochemistry, Baylor College of Medicine, Houston, Texas 77030.
Nature
|March 8, 1990
まとめ
哺乳類の遺伝子ターゲティングの効率は,標的DNA濃度によって制限されません. 研究では,正常な細胞と増幅された細胞の割合が類似していることが示されており,同質性検索は速度を制限するものではないことを示唆しています.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- 遺伝学 遺伝学とは
- 細胞生物学 細胞生物学
背景:
- 標的型DNA再結合は,酵母と比較して哺乳類の細胞では効率が低い.
- この違いは,哺乳類のゲノムにおける標的DNA配列の濃度が低いことによるものかもしれない.
研究 の 目的:
- 標的DNA濃度が哺乳類の細胞における遺伝子ターゲティングの効率を制限するかどうかを調査する.
- 中国ハムスター卵巣 (CHO) 細胞における遺伝子ターゲティング率を,異なる二酸化葉酸還元酵素 (DHFR) 遺伝子複製数で比較する.
主な方法:
- 遺伝子ターゲティングを評価するために,ポジティブ/ネガティブ選択プロトコルを使用しました.
- 正常なCHO細胞 (2 DHFRコピー) と増幅されたCHOC 400細胞 (800 DHFRコピー) の遺伝子ターゲティング効率を比較した.
主要な成果:
- DHFRロカスへの遺伝子ターゲティング効率は,正常なCHO細胞と増幅されたCHO細胞を区別することができないことが判明しました.
- 標的DNAの濃度が高いと,標的再結合の頻度は増加しなかった.
結論:
- ターゲットDNAの濃度は,哺乳類の遺伝子ターゲティングの速度を制限する要因ではありません.
- ホモロジーの探求は,哺乳類の遺伝子ターゲティング経路におけるボトルネックではない.
- ゲノムサイズの違いは,酵母細胞と哺乳類細胞の標的化結果の格差を説明しません.