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一般転写因子BTF3のための補完DNAの配列化と発現

X M Zheng¹, D Black, P Chambon

¹Laboratoire de Génétique Moléculaire des Eucaryotes du CNRS, Unité 184 de Biologie Moléculaire et de Génie Génétique de L'INSERM, Faculté de Médecine, Strasbourg, France.

|April 5, 1990

まとめ

研究者らは,遺伝子活性化に不可欠な転写因子BTF3の2つの形態を特定しました. BTF3aは転写に活発であり,より短いバージョンであるBTF3bは,RNAポリメラーゼIIと結合しているにもかかわらず,不活性である.

科学分野:

分子生物学は分子生物学である.
遺伝子規制遺伝子規制
バイオケミストリーバイオケミストリー

背景:

ユカリオット遺伝子の転写の開始には,プロモーター要素のマルチタンパク質複合体アセンブリが必要です.
重要な成分には,RNAポリメラーゼIIおよびBTF1,BTF2,BTF3,STFなどの一般的な転写因子が含まれています.
STFによって促進されるTATAボックスへのBTF1結合は,複合形成の初期段階です.

研究の目的:

以前は精製されていたが,細胞数が少ないため研究が困難だった転写因子BTF3をクローンし,特徴づけること.
BTF3.3の潜在的な異形間の機能的な違いを調査する.
転写開始複合体の組み立てにおけるBTF3の役割を理解する.

主な方法:

浄化されたBTF3.3のペプチド配列解析
ペプチド配列に基づく補完的なDNA (cDNA) のクローニング.
RNAポリメラーゼII結合分析および転写活性の評価を含む,クローンタンパク質の特徴化.

主要な成果:

2つのcDNAをクローンした:一つはBTF3aをコードし,浄化されたBTF3にマッチし,もう一つは,より短い,転写的に不活性なタンパク質BTF3bをコードする.
BTF3bには,BTF3aの最初の44個の残留物が欠けている.
BTF3aとBTF3bの両方がRNAポリメラーゼIIと安定した複合体を形成することができますが,BTF3aだけが転写的に活性です.

結論:

この研究では,BTF3の2つの同型をクローンし,特徴づけることに成功し,転写開始に関するさらなる研究のためのツールを提供しました.
BTF3aは転写的に活性な形態であり,BTF3bは不活性な変種を表しています.
BTF3bのRNAポリメラーゼIIを結合する能力は,潜在的な規制作用または前駆体/分解産物であることを示唆しています.

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