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プロゲステロン依存性細胞フリー転写における受容体活性化における機能的中間物質の特定
M K Bagchi1, S Y Tsai, M J Tsai
1Department of Cell Biology, Baylor College of Medicine, Houston, Texas 77030.
Nature
|June 7, 1990
まとめ
この研究は,プロゲステロン依存トランスクリプションを in vitro で再構成します. プロゲステロン受容体 (PR) とのホルモン結合は,hsp90解離後でも,DNA結合と活性化遺伝子発現に不可欠です.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- エンドクリノロジー エンドクリノロジー
- 遺伝子規制 遺伝子規制
背景:
- プロゲステロンは,プロゲステロン応答要素 (PREs) を通じて転写を強化する.
- プロゲステロン受容体 (PR) は,前始動複合体を形成することによって転写を調節する.
- PR媒介による転写活性化におけるリガンドの役割は完全に理解されていません.
研究 の 目的:
- in vivo ホルモン依存の転写活性化を模倣する in vitro システムを開発する.
- プロゲステロンによる遺伝子調節におけるステロイドリガンドの特定の役割を解剖する.
主な方法:
- T47D細胞の核抽出物を用いて,プロゲステロンに依存したRNA合成をインビトロで再構成する.
- プロゲステロン受容体 (PR) がPREと結合し,そのホルモン依存性の分析.
- 転写活動に関連したPR状態 (4S形式,hsp90解離) の調査.
主要な成果:
- PRE駆動プロモーターから,プロゲステロン依存型トランスクリプションを in vitro で成功裏に再構成した.
- トランスクリプションの活性化は,ホルモン誘発のPR結合によってPREに誘発され,ホルモン特異性を示した.
- DNA結合と活性化にはホルモンが必要であり,PRがhsp90.0.から解離された4S形態であった場合でも,ホルモンが必要であった.
結論:
- リンガン媒介トランザクティベーションは,ホルモン誘発のPR結合をDNAに伴う.
- hsp90の解離と4S中間体の形成は,最終的なリガンド媒介遺伝子発現活性化に先行する可能性があります.