活性化された免疫細胞のシークレトームの直接プロテオミック定量化
Felix Meissner1, Richard A Scheltema, Hans-Joachim Mollenkopf
1Department of Proteomics and Signal Transduction, Max Planck Institute of Biochemistry, Martinsried, Germany.
Science (New York, N.Y.)
|April 27, 2013
まとめ
この研究は,免疫細胞によって分泌されるタンパク質を定量化するために,質量スペクトロメトリー法を導入しています. 炎症促進タンパク質と抗炎症タンパク質の放出を制御する複雑な規制メカニズムを明らかにしています.
科学分野:
- 免疫学 免疫学とは
- プロテオミクス プロテオミクスは,プロテオミクスの
- 細胞生物学 細胞生物学
背景:
- 細胞のコミュニケーションは,生理学的機能に不可欠な分泌されるタンパク質に依存しています.
- 免疫細胞のシクレトームを理解することは,免疫反応の解読に不可欠です.
研究 の 目的:
- 免疫細胞によって放出されたタンパク質を検出および定量化するための定量的な高解像度質量スペクトロメトリーワークフローを開発する.
- Toll型受容体4活性化マクロファージの時間分解されたシクレトームを分析する.
- セクレトームとトランスクリプトームのデータを比較し,タンパク質分泌の規制メカニズムを調査する.
主な方法:
- 定量的,高解像度質量スペクトロメトリのワークフロー.
- 主要型トール型受容体4活性化マクロファージの分析.
- 分泌されたタンパク質の時間分解量化.
- セクレトームとトランスクリプトームのデータの比較.
- 遺伝モデルを使用して,分泌プロフィールを定義する.
主要な成果:
- 15万のマクロファージから52のサイトカインを含む775のタンパク質の時間解離を定量化した.
- ピコグラムの感度を達成し,10,000倍以上の豊富なタンパク質を検知し,刺激時に増加します.
- リンソソームタンパク質の転写的に分離された解離が特定されました.
- 細胞内信号伝達アダプタに依存する,明確な分泌プロファイルが定義されています.
- 抗炎症性タンパク質の分泌を保護する冗長なメカニズムと,抗炎症性タンパク質の放出を促進するシグナリングアダプターのシナジーが実証されています.
結論:
- 開発されたワークフローは,免疫細胞の秘密細胞の繊細で定量的な分析を可能にします.
- 免疫細胞のセクレトーム調節は複雑で,転写と転写後の制御の両方を含む.
- 冗余的および相乗的シグナル伝達経路は,プロおよび抗炎症タンパク質の分泌を差異的に調節する.
