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Updated: May 8, 2026
10:19
Generation of Genetically Modified Mice through the Microinjection of Oocytes
Published on: June 15, 2017
CRISPR/Cas媒介型ゲノムエンジニアリングによる複数の遺伝子の変異を携えたマウスの一段階的な生成
Haoyi Wang1, Hui Yang, Chikdu S Shivalila
1Whitehead Institute for Biomedical Research, Cambridge, MA 02142, USA.
Cell
|May 7, 2013
まとめ
CRISPR/Cas遺伝子編集システムは,マウスの複数の遺伝子を同時に破壊し,遺伝子機能と相互作用に関する研究を大幅に加速します.
科学分野:
- 遺伝学 遺伝学とは
- 分子生物学は分子生物学である.
- バイオエンジニアリング バイオエンジニアリング
背景:
- 複数の変異を持つ遺伝子組み換えマウスを生成することは,伝統的に遅い,多段階のプロセスです.
- CRISPR/Casシステムは,精密なゲノム編集のための強力なツールを提供します.
研究 の 目的:
- マウスの胚性幹細胞およびジゴットにおける多重遺伝子編集のCRISPR/Casシステムの能力を実証する.
- マルチミュータントマウスを生成するための1段階の方法を確立する.
主な方法:
- マウスのES細胞における5つの遺伝子 (Tet1,2,3,Sry,Uty) のCRISPR/Cas媒介による同時破壊.
- Tet1とTet2を標的とするCas9 mRNAとsgRNAを同注入してジゴトに注入する.
- Cas9 mRNA/sgRNAsを突然変異したオリゴと同時に注入することで,2つの遺伝子で同時に点変異が起こる.
主要な成果:
- ES細胞の5つの遺伝子を同時に破壊することで達成される高効率性.
- Tet1とTet2.2のバイアレル変異を持つマウスを生成する効率は80%です.
- 2つの標的遺伝子の正確な点変異を同時に成功裏に生成する.
結論:
- CRISPR/Casシステムは,マルチミュータントマウスを生成するための迅速かつ効率的な1段階の方法を提供します.
- この技術は,遺伝子機能,冗長性,およびエピスタシスのin vivo研究を加速します.
