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ヒトのトランスクリプトを,ハイブリッド細胞系からのHnRNAで直接クローニングする

L Corbo¹, J A Maley, D L Nelson

¹Institute for Molecular Genetics, Baylor College of Medicine, Houston, TX 77030.

Science (New York, N.Y.)

|August 10, 1990

まとめ

研究者は,Xq24-qter細胞からヒトの補完的なDNAライブラリを作成しました. このライブラリはヒトの配列を豊かにし,遺伝性疾患のX染色体長腕の遺伝子位置を特定するのに役立ちます.

科学分野:

遺伝学遺伝学とは
分子生物学は分子生物学である.
ゲノミクスゲノミクスとは

背景:

X染色体の末端領域 (Xq24-qter) には,遺伝性疾患に関連する遺伝子が含まれています.
これらの特定のヒトの遺伝子配列を隔離し,研究するために,効率的な方法が必要です.

研究の目的:

Xq24-qter領域のヒト補完DNA (cDNA) の豊富なライブラリを構築する.
この特定の染色体領域内の転写的に活性なヒト遺伝子を特定し,特徴づけること.

主な方法:

Xq24-qter領域を含むヒト-ハムスターのハイブリッド細胞系を利用した.
合成されたcDNAは,ヒトAluのリピートオリゴヌクレオチドでプライムされた異質な核RNA (hnRNA) を使用しています.
人間の起源と遺伝子マッピングのためのcDNAクローンをスクリーニングし,特徴づけました.

主要な成果:

少なくとも80%のヒト由来配列を備えたcDNAライブラリを構築し,著しい濃縮を達成しました.
ヒポキサンチン・グアニン・フォスフォリボシルトランスフェラーゼ (HPRT) 遺伝子および他の遺伝子ファミリーの断片を含むクローンを特定した.
Xq24-qter内の様々な部位に追加のcDNAクローンをマッピングし,複数の活性遺伝子ロケーションの分離を示しました.

結論:

構築されたcDNAライブラリは,Xq24-qter領域のヒト配列を効果的に豊かにします.
孤立したcDNAクローンは,X染色体上の遺伝的疾患に関連した遺伝的位置を特定するための貴重な探査機として機能します.

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