カーディオミオサイトを,カーディオミオサイト特有のmRNAを標的とする分子ビーコンを用いて,多能幹幹細胞の分化から浄化する

科学分野:

• 心血管生物学 心血管生物学
• 幹細胞生物学 幹細胞生物学
• 分子プローブ 分子プローブ

背景:

• プラリポテント幹細胞から心臓筋細胞を導出するための現在の方法は,異質な細胞集団を生成します.
• 効果的な細胞治療と研究のために,心筋細胞の浄化は非常に重要です.

研究 の 目的:

• 多能幹細胞から派生した心臓筋細胞を浄化する新しいシステムを開発する.
• 効率的な細胞選択のために,心筋細胞特有の分子ビーコン (MBs) を利用する.

主な方法:

• 心臓特異的なmRNAを標的とした5つのMBsを生成しました.
• フローサイトメトリを用いて,ミオシン重鎖6/7のmRNA標的MB (MHC1-MB) の特異性を検証した.
• MHC1-MBをニュクレオフェクションによる多能幹細胞の分化に提供した.
• 光活性化細胞分類 (FACS) を使用したMHC1-MB陽性細胞の分類.

主要な成果:

• MHC1-MBは99%までの心筋細胞を特定し,心筋細胞以外の細胞タイプへの結合が最小限であることが示されました.
• MHC1-MB陽性細胞のFACS分類により,心臓のマーカーを発現する≈97%の純粋な心筋細胞が得られました.
• 精製された心筋細胞は,鼓動と電気生理学的特性を含む特徴的な機能を維持しました.
• 精製された心筋細胞を心筋梗塞モデルに移植すると,心臓の機能が改善され,腫瘍の形成なしに持続的な移植が示されました.

結論:

• 多能幹細胞から高度に精製された心筋細胞を生成するための新しく効果的なシステムを開発した.
• MBベースの浄化システムは,心臓肌細胞細胞療法と薬剤発見を進めるための貴重なツールを提供します.