合理的に設計された短いポリイソプレノール結合のPglB基板は,エンジニアリングされたポリペプチドとタンパク質のN-グリコシル化のために設計されています
Feng Liu1, Balakumar Vijayakrishnan, Amirreza Faridmoayer
1Department of Chemistry, Chemistry Research Laboratory, Oxford University , Oxford OX1 3TA United Kingdom.
Journal of the American Chemical Society
|January 1, 2014
まとめ
研究者は,C. jejuni PglB酵素の脂質キャリア特異性を調査しました. 短いC20プレノールが効果的な脂質媒介体であることが判明し,N-リンクされたグリカン (N-linked glycans) の効率的なインビトロ合成を可能にしました.
科学分野:
- バイオケミストリー バイオケミストリー
- グライコバイオロジーは,
- 酵素学 酵素学とは
背景:
- タンパク質N-グリコシレーションは,翻訳後の重要な修正である.
- キャンピロバクター・ジェジュニのPglB酵素は,N-グリコシル化酵素の鍵である.
- 脂質キャリア特異性を理解することは,酵素性グリコシレーションの最適化に不可欠です.
研究 の 目的:
- C. jejuni PglB.の脂質キャリア特異性を調査する.
- PglB媒介のグリコシル化のための効果的な脂質キャリアを特定する.
- グライココンジュガート合成のための効率的なインビトロメソッドを開発する.
主な方法:
- 天然および非天然のポリイソプレノール糖パイロフォスファート (C10-C40) の合成配列を試験する.
- 酵素とタンパク質の相互作用を決定するために,運動分析を使用します.
- PglB.のための in vitro 合成条件の最適化
主要な成果:
- 短く,合成的に利用可能なC20プレノール (ネリルネロールとゲラニルネロール) は,効果的な脂質伝達物質であることが証明されました.
- 運動分析は,脂質鎖の長さによるK (((M)) 単独の調節を示した.
- Asn-リンクされたβ-N-GlcNAc-イラテッドペプチドとタンパク質について,in vitroで>90%の収量を達成しました.
結論:
- C. jejuni PglBは,脂質キャリアの選択において柔軟性を示しています.
- 短いC20プレノールは,PglBの効率的な基質である.
- PglBと化学的に合成された前体を使用して,グリココンジュゲート合成のためのシンプルで柔軟な生物触媒法が確立されています.
関連する概念動画
Oligosaccharide Assembly
2.6K
Protein glycosylation starts in the ER lumen and continues in the Golgi apparatus. Glycosyltransferases catalyze the addition of sugar molecules or glycosylation of proteins. Usually, these enzymes add sugars to the hydroxyl groups of selected serine or threonine residues to form O-linked glycans or the amino groups of asparagine residues to form N-linked glycans. Different positions on the same polypeptide chain can contain differently linked glycans.
Multiple sugar molecules that may or may...
Multiple sugar molecules that may or may...
2.6K
Protein Glycosylation
8.4K
Glycosylation, the most common post-translational modification for proteins, serves diverse functions. Adding sugars to proteins makes the proteins more resistant to proteolytic digestion. Glycosylated proteins can act as markers and receptors to promote cell-cell adhesion. Additionally, they have many essential quality control functions in the cell, such as correct protein folding and facilitating transport of misfolded proteins to the cytosol, which can be degraded.
Glycosylation occurs in...
Glycosylation occurs in...
8.4K
Protein Folding Quality Check in the RER
4.4K
ER is the primary site for the maturation and folding of soluble and transmembrane secretory proteins. The calnexin cycle is a specific chaperone system that folds and assesses the confirmation of N-glycosylated proteins before they can exit the ER lumen. The primary players of this quality check pipeline are the lectins, ER-resident chaperones, and a glucosyl transferase enzyme. In case the calnexin system in the lumen fails to salvage a misfolded protein, it is transported to the cytoplasm...
4.4K
Biosynthesis of Polysaccharides
984
Polysaccharides such as glycogen and starch are synthesized from nucleoside diphosphate sugars, primarily uridine diphosphate glucose (UDPG) and adenosine diphosphate glucose (ADPG). These activated glucose donors act as key intermediates in carbohydrate metabolism and biosynthesis. UDPG primarily involves glycogen synthesis in animals and many bacteria, while ADPG plays a fundamental role in starch synthesis in plants and certain bacteria.UDPG is formed when glucose-1-phosphate reacts with...
984
Proteoglycans
4.1K
Glycans, a class of complex heterogeneous molecules, can be covalently attached to proteins to form glycosylated proteins that regulate various physiological and pathological processes. Glycosylated proteins or glycoproteins comprise N-linked and O-linked oligosaccharides. O-glycosylation is the most common type of protein glycosylation. Here, glycans attach to the oxygen atom of the hydroxyl groups of Serine or Threonine residues. O-linked glycosylation occurs later in protein processing,...
4.1K


