高温SELMA:HIV bnAb 2G12によってしっかり認識されるDNAでサポートされたオリゴマノースクラスタの進化

科学分野:

• 炭水化物化学 炭水化物の化学
• 免疫学 免疫学とは
• バイオテクノロジー バイオテクノロジー

背景:

• SELMAのような誘導進化法では,レクチン認識のためのDNAでサポートされた炭水化物クラスタを最適化します.
• 以前のSELMAアプリケーションでは,HIV抗体2G12によって認識された中等 afinityのオリゴマノースグリカンが生成されました.
• HIV抗体2G12は,HIV包膜タンパク質 gp120.0の保存されたエピトープを標的にする.

研究 の 目的:

• 強化されたグリコクラスター設計のための修正されたSELMA方法を開発する.
• 結合親和性が著しく向上し,グリカン密度が低下した新しいグリコクラスターを作成する.
• これらの最適化されたグリコクラスターが,HIVに対する広範に中和する抗体を誘発するための免疫原体としての可能性を調査する.

主な方法:

• 変更されたアプタマー (SELMA) 技術によるSELectionの変更.
• 異なる数のオリゴマノースグリカンを持つDNAサポートされたグリコクラスターの合成.
• 抗体とグリカンの相互作用を定量化するために,表面プラズモン共鳴または類似の技術を使用して,親和度測定 (Kd) を行う.
• 広く中和するHIV抗体2G12.2によるグリコクラスター認識の評価

主要な成果:

• 改変されたSELMA法では,以前の方法と比較して,ターゲット認識が100倍向上したグリコクラスターが得られました.
• これらの新しいグリコクラスターは,強い結合のために,より少ないグリカン (3-4単位) を必要とした.
• グライコクラスターは,HIV抗体2G12で低いナノモラー解離定数 (Kdは1.7nM以下) を示した.
• 最適化されたグリコクラスターによって達成された結合親和性は,ネイティブのHIVエンベロープタンパク質 gp120.pと一致しました.

結論:

• 改造されたSELMAアプローチにより,最小限のグリカン成分を持つ強力なグリコクラスターを作成できます.
• これらの最適化されたグリコクラスターは,HIV抗体2G12.2を標的にする上で重要な進歩を表しています.
• 開発されたグリコクラスターは,HIV抗体の大規模な中和を誘導する免疫原体として使用するための有望な候補である.