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クローン化とXenopus胚のギャップジャンクションタンパク質の発現

L Ebihara¹, E C Beyer, K I Swenson

¹Department of Pharmacology, Columbia University, New York, NY 10032.

Science (New York, N.Y.)

|March 3, 1989

まとめ

研究者らは,胚の早期発育と細胞伝達に不可欠なXenopusのギャップジャンクション遺伝子をクローンし,配列化しました. この発見は,両生類の胚分化とシグナル伝達経路の理解を進めています.

科学分野:

発達生物学発達生物学とは
細胞生物学細胞生物学
分子生物学は分子生物学である.

背景:

ギャップ・ジャンクションは細胞間通信を促進し,早期の水陸生物の胚の分化を制御する可能性がある.
ギャップジャンクションの分子基礎を理解することは,胚の発達を解読する鍵です.

研究の目的:

Xenopusの卵細胞と初期の胚のギャップジャンクションタンパク質をコードする補完DNA (cDNA) をクローンして配列化する.
Xenopusの発達中のこのギャップジャンクション遺伝子の発現パターンを調査する.
機能的に確認するために,クローンされたcDNAはギャップジャンクションチャネルをコードします.

主な方法:

補完的なDNA (cDNA) クローンとクセノプスのギャップジャンクション遺伝子の配列化.
卵細胞および様々な成人の臓器におけるメッセンジャーRNA (mRNA) 発現レベルを決定するためのRNAブラット分析.
In vitro RNA合成と,その後のXenopus卵細胞への注射により,ギャップジャンクションタンパク質を過剰に発現させる.
RNAを注入した卵細胞ペアの細胞-細胞チャネル形成の電気生理学的分析.

主要な成果:

ネズミのコネクシン32とコネクシン43に同質な,Xenopusのギャップ・ジャンクション・プロテインをコードするcDNAがクローン・シーケンス化され,成功しました.
対応するmRNAは卵細胞に豊富に存在するが,胚発達の第15段階までに著しく減少し,成人の臓器では検出できない.
クローン化されたcDNAの過剰発現により,Xenopusの卵細胞に機能的で,時間および電圧に敏感な細胞-細胞チャネルが形成された.

結論:

クローン化されたクセノプスのcDNAは,初期胚の発達に関与する機能的なギャップジャンクションタンパク質をコードする.
時間の表現パターンは,早期のXenopus胚形成の際にこのギャップ・ジャンクションが重要な役割を担うことを示唆しており,成人の組織では重要性が低下しています.
この研究は,両生類の発達におけるギャップジャンクション媒介信号伝達の理解のための分子基盤を提供します.

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