GAL4のDNA結合特異性を変化させるには,亜鉛指の隣接する配列が必要です

科学分野:

• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝学 遺伝学とは
• バイオケミストリー バイオケミストリー

背景:

• ユカリオットの転写制御には,しばしば,亜鉛指ドメインを持つDNA結合タンパク質が含まれます.
• マルチ亜鉛指タンパク質では,これらのドメインがDNA結合特異性を与える.
• GAL4は単一の亜鉛指を持つ酵母転写活性化剤です.

研究 の 目的:

• GAL4のDNA結合特異性における亜鉛指領域の役割を調査する.
• GAL4の亜鉛指領域が他の酵母活性化剤の亜鉛指領域と互換性があるかどうかを判断する.
• GAL4の特定のDNA配列認識を担当する領域を特定する.

主な方法:

• タンパク質工学: GAL4の亜鉛指領域をPPR1.1の亜鉛指領域に置き換える.
• タンパク質改変後の特異性を評価するためのDNA結合測定法.

主要な成果:

• GAL4の亜鉛指領域の28のアミノ酸のうち27を類似のPPR1領域に置き換えても,GAL4のDNA結合特異性は変化しませんでした.
• GAL4の亜鉛指に隣接する14アミノ酸領域は,特定のDNA配列認識に不可欠であることが判明しました.

結論:

• GAL4の亜鉛指領域は,そのDNA結合特異性の主要な決定因子ではありません.
• 独特の隣接する領域は,GAL4によるシーケンス固有のDNA認識において重要な役割を果たします.
• この発見は,亜鉛指がトランスクリプションアクティベーターのDNA結合特異性を決定する唯一の一般的なモデルに異議を唱えている.