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サルコプラズマ網膜の予測されたトランスメブラン領域内の高親和性Ca2+結合部位の位置Ca2+-ATPase

D M Clarke¹, T W Loo, G Inesi

¹Banting and Best Department of Medical Research, C. H. Best Institute, University of Toronto, Ontario, Canada.

|June 8, 1989

まとめ

研究者らは,カルシウムを輸送するATPase (Ca2+-ATPase) 酵素に含まれる重要なアミノ酸を特定した. 超膜領域付近の6つの特定の残基は,高親和性カルシウム結合および輸送機能に不可欠である.

科学分野:

バイオケミストリーバイオケミストリー
分子生物学は分子生物学である.
メンブレーン輸送メンブレーン輸送

背景:

Ca2+-ATPaseのようなカチオンポンプは,フォスフォ酵素の中間体を通じてイオンを輸送する.
既知の構造にもかかわらず,高親和性カチオン結合部位は未だに難解である.

研究の目的:

サルコプラズマ網膜におけるCa2+結合に責任のある特定のアミノ酸を特定する.Ca2+-ATPase.
高親和性カルシウムイオン結合の構造的基礎を解明する.

主な方法:

オリゴヌクレオチド誘導のサイト固有の変異生成が用いられました.
変異したCa2+-ATPase酵素は,特定のアミノ酸残基を変化させることで作られました.

主要な成果:

Glu 309,Glu 771,Asn 796,Thr 799,Asp 800,またはGlu 908を改変すると,Ca2+輸送とCa2+依存型リン酸化が完全に失われる.
変異酵素は,野生型とは異なり,Ca2+が存在した場合でも,無機リン酸でリン酸化を示した.

結論:

少なくとも6つの極性,酸素を含む残留物は,Ca2+結合に不可欠である.
これらの残留物は,トランスメブラン領域の中心に近い位置にあり,高親和性Ca2+結合部位を形成する可能性が高い.

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