CRISPR/Cas9システムによる腫瘍性染色体再構成のインビボエンジニアリング
Danilo Maddalo1, Eusebio Manchado1, Carla P Concepcion2
1Memorial Sloan Kettering Cancer Center, Cancer Biology and Genetics Program, 1275 York Avenue, New York, New York 10065, USA.
Nature
|October 23, 2014
まとめ
研究者は,特定の染色体再配列を誘導することによって,がんのマウスモデルを作成するための新しいCRISPR/Cas9方法を開発しました. この技術は,ALK阻害剤に反応した4 (EML4) - アナプラスティックリンパ腫キナーゼ (ALK) 肺がんのようなエキノダームのマイクロチューブル関連タンパク質のモデルを成功裏に生成しました.
科学分野:
- 腫瘍学 腫瘍学
- 遺伝学 遺伝学とは
- 分子生物学は分子生物学である.
背景:
- 染色体の再編成は,ヒトがんの病原性における重要な原動力であり,しばしば治療的に標的となる遺伝子融合につながります.
- 染色体2の逆転により生じる4 (EML4) - アナプラスティックリンパ腫キナーゼ (ALK) 融合遺伝子のようなエキノダームのマイクロチューブル関連タンパク質は,非小細胞肺がん (NSCLC) のサブセットにおける重要な腫瘍遺伝子である.
- マウスにおけるこのような遺伝的出来事をモデル化するための既存の方法は複雑で,広範な生殖線操作を必要とする.
研究 の 目的:
- CRISPR/Cas9テクノロジーを用いて特定の染色体再配列を誘導するための効率的なin vivo方法を確立する.
- EML4-ALK誘発性肺がんに対する新しいマウスモデルを作成する.
- このモデルの有用性を検証し,がんの病原性と治療反応を研究する.
主な方法:
- CRISPR/Cas9システムのウイルスの媒介による伝達を利用して,成人のマウスの体細胞に標的型染色体逆転を誘発した.
- EML4-ALK融合遺伝子を特化したマウスモデルを生成しました.
- 結果的に発生した腫瘍を組織病理学および分子特性について分析し,ALK阻害剤に対する反応を評価した.
主要な成果:
- CRISPR/Cas9法は,特定のEML4-ALKの逆転をin vivoで効率的に誘導した.
- 生成されたマウスモデルは,腫瘍形成と融合遺伝子の発現を含む,ヒトALK陽性NSCLCの重要な特徴を正確に再現した.
- マウスモデルの腫瘍は,ALK阻害剤に対する感受性を示し,ヒト患者の臨床観察を反映した.
結論:
- ウイルス媒介のCRISPR/Cas9伝達は,染色体の再編成と関連するがんを vivo でモデル化するための効率的な戦略を提供します.
- このアプローチは,ヒトの癌に対する遺伝子工学によるマウスモデルを作成する能力を大幅に向上させます.
- 開発されたEML4-ALK肺がんモデルは,ALK駆動性NSCLCを標的とした臨床前研究と医薬品開発のための貴重なプラットフォームとして機能します.
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