酵母人工染色体クローンのライブラリからヒトの単一複製遺伝子を分離した

B H Brownstein¹, G A Silverman, R D Little

¹Department of Genetics, Washington University School of Medicine, St. Louis, MO 63110.

Science (New York, N.Y.)

|June 16, 1989

まとめ

研究者は,酵母人工染色体を使ってヒトの遺伝子をクローン化しました. この方法により,大規模なDNAセグメントの安定的な伝播が可能になり,全ヒトゲノムのクローン化への道が開けます.

科学分野:

遺伝学遺伝学とは
分子生物学は分子生物学である.
イースト遺伝学イースト遺伝学

背景:

新しいクローンシステムでは,酵母人工染色体 (YACs) を利用して,大型DNA分子を増殖させています.
このシステムは,ヒトゲノムの部分を含む大規模なDNAセグメントをクローンするための潜在的な方法を提供します.
YAC ライブラリから特定のシーケンスを効率的に回収し,拡散することは,アプリケーションにとって極めて重要です.

研究の目的:

YACシステムを使用して特定のヒトの遺伝子をクローンする可能性を実証する.
YACs内のクローンヒトDNA配列の安定性と忠誠度を評価する.
特定の単一複製のヒト遺伝子を含むYACクローンを分離し,特徴づけること.

主な方法:

ヒトのDNAからYACライブラリを作りました.
YACのライブラリを特定の人間の遺伝子のためにスクリーニングします.
孤立したYACクローンのサイズと安定性の特徴.

主要な成果:

ヒトの2つの単一複製遺伝子,因子IXとプラズミノゲン活性化阻害剤2型は,クローン化に成功しました.
各遺伝子に対して複数の独立したYAC単離物が得られた.
クローンされたDNA断片は60から650キロベースまであり,酵母の中で長期間繁殖する際に安定していた.

結論:

酵母人工染色体システムは,大きなヒトDNAセグメントをクローンするのに有効です.
人間の遺伝子を含むYACクローンは安定しており,忠実な複製物であるように見えます.
この技術は,大規模なゲノムクローニングの取り組みに期待を寄せている.

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