浄化されたドロソフィラのホメオドメインタンパク質は,インビトロでの転写を抑制する

科学分野:

• 発達生物学 発達生物学とは
• 分子生物学は分子生物学である.
• 遺伝学 遺伝学とは

背景:

• 均等スキップ (eve) 遺伝子は,Ultrabithorax (Ubx) のような重要な発達遺伝子を抑制することが知られているホメオドメインタンパク質をコードします.
• ホメオドメインのタンパク質は,胚の発達の重要な調節因子ですが,その転写調節の正確なメカニズムはまだ解明されていません.

研究 の 目的:

• 生物化学的に,精製された均等スキップ (eve) タンパク質が転写を直接抑制できることを実証する.
• DNA結合要件と,e-mediatedトランスクリプション抑制のための細胞文脈を調査する.

主な方法:

• 精製されたEVEタンパク質とUltrabithorax (Ubx) プロモーターを用いたインビトロ転写アッセイ.
• ドロソフィラ菌の組織培養細胞におけるレポーター遺伝子解析により,eveがUbxプロモーター活動に与える影響を評価した.
• 転写抑制に対するDNA結合部位依存性と指向効果の分析.

主要な成果:

• 精製された均等スキップ (eve) タンパク質は,Ultrabithorax (Ubx) プロモーターからの転写を,DNA結合部位に依存した方法で直接抑制した.
• 抑制は,RNA開始部位またはその方向性に対するDNA結合部位の位置に関係なく発生しました.
• また,even-skipped (eve) は,ドロソフィラ菌の組織培養細胞におけるUbxプロモーター発現を抑制し,細胞環境におけるその役割を確認した.

結論:

• 均等スキップ (eve) タンパク質は,アクティベーター結合の競争的阻害から独立して,直接の転写抑制剤として機能します.
• eveは,プロモーターに結合する他のタンパク質の機能に干渉し,発達の遺伝子調節のための新しいメカニズムを提供します.
• この研究は,ドロソフィラホメオドメインのタンパク質が,発達のプロセスを制御する転写因子として作用する,という生化学的証拠を提供する.