Staphylococcus aureus Cas9を使用したインビボゲノム編集
F Ann Ran1, Le Cong2, Winston X Yan3
11] Broad Institute of MIT and Harvard, Cambridge, Massachusetts 02142, USA [2] Society of Fellows, Harvard University, Cambridge, Massachusetts 02138, USA.
Nature
|April 2, 2015
まとめ
Smaller Staphylococcus aureus Cas9 (SaCas9) は,アデノ関連ウイルスベクターによる効率的なゲノム編集を可能にします. このSaCas9システムは,マウスのPcsk9遺伝子を成功裏に改変し,高特異性でコレステロールレベルを下げました.
科学分野:
- 分子生物学は分子生物学である.
- バイオテクノロジー バイオテクノロジー
- 遺伝学 遺伝学とは
背景:
- Cas9酵素は,ゲノム編集のための強力なツールです.
- Streptococcus pyogenes Cas9 (SpCas9) の大きさは,アデノ関連ウイルス (AAV) 配送システムでの使用を制限しています.
- 効率的なAAV媒介遺伝子編集には,より小さなCas9変種が必要です.
研究 の 目的:
- ゲノム編集のための小さなCas9のオートロログを特徴付けるために.
- In vivo遺伝子編集のためのStaphylococcus aureus Cas9 (SaCas9) の効率と特異性を評価する.
- AAV配信を使用してSaCas9の治療的可能性を実証する.
主な方法:
- 6つの小さなCas9オーソログの特徴.
- マウスの肝臓におけるインビボゲノム編集は,AAV.経由で発送されるSaCas9を用いてPcsk9遺伝子を標的にする.
- 遺伝子改変効率の評価と血清Pcsk9とコレステロールレベルの低下.
- BLESS (Binding and Ligation-based Exonuclease Sequencing) を使用した全ゲノム特異性分析を行いました.
主要な成果:
- Staphylococcus aureus Cas9 (SaCas9) は,SpCas9.9に匹敵するゲノム編集効率を示した.
- SaCas9は,SpCas9よりも1キロベース短くなっており,AAVのパッケージ化を容易にする.
- In vivo SaCas9の投与により,1週間以内にマウスの肝臓におけるPcsk9遺伝子改変が>40%に達した.
- 編集後,血清Pcsk9および全コレステロール濃度の有意な低下が観察されました.
- SaCas9は,in vivoにおいて,効率的で特定の全ゲノム標的化を示した.
結論:
- SaCas9は,ゲノムエディティングアプリケーションのためのSpCas9の実行可能な,より小さな代替案です.
- AAVで包装されたSaCas9は,治療的可能性のある効率的なin vivo遺伝子編集を可能にします.
- SaCas9媒介による編集は,高コレステロール血症のような状態を管理するための有望な戦略を提供します.
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