In Vitro リバーシブル・トランスレーション・コントロール
Taylor D Canady1, Cheryl A Telmer1, Stanley N Oyaghire1
1†Department of Chemistry, ‡Department of Biological Sciences, and §Center for Nucleic Acids Science and Technology, Carnegie Mellon University, 4400 Fifth Avenue, Pittsburgh, Pennsylvania 15213, United States.
Journal of the American Chemical Society
|August 5, 2015
まとめ
研究者はペプチド核酸 (PNA) を使用して遺伝子発現を制御する新しい方法を開発しました. この技術は反転可能な遺伝子抑制と 潜在的 in vivo 調節を可能にし,アンチセンセスの技術を進めている.
科学分野:
- 化学生物学
- 分子生物学
- アンチセンセセプティック
背景:
- 需要に応じて遺伝子発現を制御することは 化学生物学と反感覚薬の開発に不可欠です
- 現在の方法はしばしば挿入された遺伝要素に依存しますが,ネイティブの遺伝子発現を直接制御することは困難です.
- アンチセンセスの技術は,補完的な配列の相互作用を通じて遺伝子発現を制御することを目的としています.
研究 の 目的:
- 補完的な配列の相互作用を用いたオンデマンドの可逆的な遺伝子発現の調節方法を開発する.
- 遺伝子翻訳の抑制と回復を証明するために
- この技術の in vivo 応用の可能性を探求する.
主な方法:
- 細胞フリートランスレーションシステムを用いて 遺伝子抑制をテストした
- mRNA結合のためのトホルト配列を持つガンマ変異ペプチド核酸 (γPNA) を採用した.
- アンチセンセスの配列を放出するために,第二の γPNA または補完RNA を使用して,研究された鎖移転反応.
主要な成果:
- γPNAアンチセンセスの配列を用いたルシフェラーゼ遺伝子の可逆抑制が成功しました.
- 完全に補完的な γPNA を使って鎖の移動によって翻訳を復元できることを示した.
- 補完的なRNAは結合された γPNA を置き換えて,潜在的ネイティブ遺伝子調節を可能にすることが確認されました.
結論:
- γPNA-mRNAの相互作用に基づく可逆性遺伝子発現制御のための新しいシステムを開発した.
- ストランドシフト反応は,需要に応じて遺伝子翻訳を復元するメカニズムを提供します.
- この発見は,ネイティブRNA配列によるin vivo遺伝子調節の可能性を示唆している.
