AGO2へのmiRNAロードおよびmiRNA-mRNA相互作用ネットワークの再構築におけるTP53の役割

Jonathan Krell¹, Justin Stebbing¹, Adam Enver Frampton²

¹Division of Oncology, Department of Surgery and Cancer, Imperial Centre for Translational and Experimental Medicine (ICTEM), Imperial College, London, UK.

|August 28, 2015

まとめ

腫瘍タンパク質p53 (TP53) は,AGO2へのマイクロRNA (miRNA) の負荷を調節し,遺伝子発現とDNA損傷に対する細胞反応に影響を与えます. TP53によるmiRNA- AGO2負荷の制御は,がんの発症における新しいメカニズムである.

科学分野:

分子生物学
癌研究
遺伝学

背景:

DNA損傷反応経路は腫瘍形成を防ぐために重要です.
腫瘍タンパク質p53 (TP53) は,遺伝子およびマイクロRNA (miRNA) の発現を調節することによって,DNA損傷の監視に中心的な役割を果たします.
AGO2へのmiRNAの負荷の調節におけるTP53の正確な役割と,DNA損傷中の標的遺伝子への影響は,ほとんど未調査のままである.

研究の目的:

DNA 損傷に対する反応として miRNA の AGO2 への負荷を調節する TP53 の役割を調査する.
TP53によって媒介されるAGO2の標的遺伝子への結合における全体的な変化を解明する.
DNA 損傷と癌の文脈で TP53による miRNA 調節の新しいメカニズムを特定する.

主な方法:

ドクソルビシンでTP53ワイルド型とゼロ細胞の刺激
RNAシーケンシング (RNA-Seq) とAGO2-免疫プレシピテッドRNAシーケンシング (AGO2-RIP-Seq) で,miRNAとmRNAの発現を分析する.
結合されたAGO2 RIP- seqと光活性化リボヌクレオシド強化クロスリンクと免疫降水 (PAR- CLIP- seq) でmiRNA- mRNAの相互作用をマッピングする.

主要な成果:

TP53はAGO2と直接結合し,let-7ファミリーを含む特定のmiRNAのAGO2への負荷を調節する.
変異したTP53はAGO2と相互作用するが,miRNAの放出を媒介し,miRNAの活性を低下させる.
TP53調節されたmiRNAは複雑なフィードバックとフィードフォワード回路を形成し,DNA修復またはアポトーシスのための遺伝子発現を微調整します.

結論:

AGO2 負荷に対する TP53 の制御は,miRNA 調節の新しいメカニズムを表しています.
この制御経路は発がんに絡み合っており癌の発生に関する新しい洞察を提供しています

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