光基板図書館ベースの酵素発見による in vivo ターゲティングに適した組織限定の生物反応の特定

科学分野:

• 生物化学
• 酵素学
• 化学生物学

背景:

• 組織特異的な生物反応は,標的化生物学的ツールや前薬の開発の鍵です.
• 酵素の発見は,特定の生物反応経路を特定するために不可欠です.

研究 の 目的:

• 組織特有の酵素活性を発見するための新しいスクリーニングアプローチを開発する.
• 光基板と前薬の標的投与のための酵素マスクグループペアを特定する.

主な方法:

• 組織抽出物を分析するために,光基板図書館ベースのスクリーニングアプローチが採用されました.
• 候補タンパク質を特定するために,ディケド電泳ゲル測定法とペプチド質量指紋を用いた.
• 特定されたタンパク質の酵素活性は,特定の基板を用いて検証された.

主要な成果:

• ピルビルアニリドは,カルボキシルエステラーゼ2 (CES2) によって特異的に水解された基質として識別された.
• 炭酸エステラーゼ2 (CES2) は主に肝臓と腎臓の組織に局在する.
• ピルビルの標的群とCES2酵素のペアは,7アミノ4メチルクマリン・フローロフォアの肝臓と腎臓へのインビボ投与を容易にした.

結論:

• 開発されたスクリーニングアプローチは,組織特有の酵素活性を発見するのに有効です.
• ピルビルの標的群とCES2酵素のペアは,標的薬の投与とイメージングの可能性を示しています.
• この方法は,先進的な前薬および光基板の開発のための他のマスクグループ/酵素ペアを特定するために拡張できます.