リモによる反応のステレオ化学的経路,ラジカルSAMメチルチオトランスファーゼ
Bradley J Landgraf1, Squire J Booker1
1Department of Chemistry, ‡Department of Biochemistry and Molecular Biology, and §The Howard Hughes Medical Institute, The Pennsylvania State University , University Park, Pennsylvania 16802, United States.
RimO酵素はメチルチオ群をタンパク質S12に結合する. この研究は,RIMOがアスパルテートからプロ-S水素原子を抽出することを明らかにし,これはその過激なS-アデノシルメチオニン (SAM) 依存メカニズムにおける重要なステップである.
科学分野:
- 生物化学
- 酵素学
- 分子生物学
背景:
- RimOは S- アデノシルメチオニン (SAM) 酵素である.
- リボソームタンパク質S12におけるアスパルテート89のメチルチオ化を触媒化する.
- 反応のメカニズムは不明でした.
研究 の 目的:
- リモ反応のステレオ化学的経路を解明する.
- メチルチオ群がタンパク質S12に結合するメカニズムを調べる
主な方法:
- 使用したペプチドはS12タンパク質を模倣し,デウテリウムでラベルを貼った.
- デウテリウムから5'-デオキシアデノシン (5'-dAH) への変換を分析した.
- 水素原子の抽象化のための測定された運動同位体効果.
主要な成果:
- RimOは,ターゲットアスパルチル残基からプロ-S水素原子を抽出します.
- H と D の抽象化において,運動同位体効果が ~1. 9 であったことが観察された.
- in vivo 還元系 (フラボドキシン/フラボドキシン酸化還元酵素/NADPH) は,リモに電子を供給することができる.
結論:
- 立体化学分析により,RIMOによるプロ-S水素抽出が確認された.
- 水素抽出は部分的に速度を決定するステップです.
- RimOは,その活動のために確立された細胞減少システムを活用することができます.
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