増加したダイナミックレンジを持つ半合成型光センサータンパク質の一般的戦略
Lin Xue1, Efthymia Prifti1, Kai Johnsson1
1Institute of Chemical Sciences and Engineering (ISIC), Institute of Bioengineering, National Centre of Competence in Research (NCCR) Chemical Biology, École Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL) , 1015 Lausanne, Switzerland.
Journal of the American Chemical Society
|April 13, 2016
まとめ
新しい光センサータンパク質を 開発しました 自己標識タグと 非自然なアミノ酸を使って 精密な分析物質の検出です これらのセンサーは,研究と診断のアプリケーションのために大きなダイナミックレンジを提供します.
科学分野:
- 生物化学
- 分子生物学
- バイオテクノロジー
背景:
- 繊細でダイナミックな光センサーの開発は 生物学的研究にとって不可欠です
- 既存のセンサー技術には ダイナミックレンジとセルラーアプリケーションの 限界があります
研究 の 目的:
- ダイナミックな範囲を拡張した 半合成型 流体感光センサータンパク質を作る
- セルフラベルタンパク質と 非自然なアミノ酸技術を センサー開発に活用する
主な方法:
- SNAPタグ技術を用いて,光タンパク質と結合するタンパク質にラベルを貼る.
- 非自然なアミノ酸技術を組み込み 結合部位の近くで 2番目のフッ素素を配置する
- 分析剤の結合時に光共振エネルギー伝送 (FRET) 障害を利用する.
主要な成果:
- メソトレクサートに対するダイナミックレンジを32まで in vitroで生成した.
- センサーのダイナミックレンジは 13 でした
- センサーの性能を in vitro と 細胞環境の両方で検証した.
結論:
- 自己表示タグと非自然なアミノ酸の組み合わせにより 高性能センサータンパク質が作られます
- これらの半合成センサーは 基礎研究と診断アプリケーションに 重要な利点をもたらします
- 開発されたセンサープラットフォームは,高感度で様々な分析物質を検出する見込みを示しています.
